用RAPD技术对三类水产经济动物基因组DNA多态性研究.pdf

硕士论文 用RAPD技术对三粪水产经济动物基．an．ttw．DNA多态性的研究邢荣莲 用RAPD技术对三类水产 经济动物基因组DNA多态性的研究 摘 要 利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术，分别对13种双壳贝类、3种鲍—— 中间鲍(Haliotis midae)、皱纹盘鲍fHdiscus supertextej以及5种经济类海胆——紫海胆口nthocidaris crassispina)、海刺猬 (Glyptocidariscrenularis)、马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)、光棘球海胆 (Strongylocentrotusnudus)和中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)的基因组 DNA多态性进行检测，对其亲缘关系进行了初步的探讨。其主要结果如下： 1．经20个随机引物对3个科的13种双壳贝类(其中帘蛤科9种、蛤蜊科3 种、樱蛤科1种)基因组DNA进行扩增，共得到558条扩增片段，片段长度在 200～1 800bp之间，UPGMA和卜U两种聚类分析方法分别得到的系统树结果基本 一致。帘蛤科、蛤蜊科和樱蛤科三科之间存在差别，蛤蜊科与帘蛤科的镜蛤亚科 聚在一起，因而帘蛤科与蛤蜊科的亲缘关系较近，而与樱蛤科的亲缘关系相对较 远。帘蛤科的种类基本聚为一类，与传统分类相吻合：帘蛤科各亚科间表现出不 同的差异，镜蛤亚科与实验所的帘蛤科的其它亚科的亲缘关系较远，菲律宾蛤仔 与青蛤、江户布目蛤与文蛤的亲缘关系较近，紫石房蛤与青蛤和文蛤的亲缘关系 较近，而与江户布目蛤较远。 2．经24个随机引物对3种鲍基因组DNA进行扩增，共得到376条扩增片 段，片段长度在250～2 500bp之间。由平均遗传距离指数，用UPGMA和NJ两 种聚类分析方法得到的结果基本一致，3种鲍聚为三类，与3种鲍形态上存在明 显差异的结果基本吻合。 3．经20个随机引物对5种经济类海胆基因组DNA进行扩增，共得到377 条扩增片段，片段长度在200～1 400bp之间。两种聚类分析方法进行处理得到的 结果也一致。长海胆科与疣海胆科有较近的亲缘关系，球海胆科的光棘球海胆与 中间球海胆有较近的亲缘关系，其次是马粪海胆。 关键词RAPD基因组DNA亲缘关系双壳贝类鲍海胆 邢荣莲 硪士论文 用RAPD技术对三类水产经济动物基因组DNA多态性的研究 前 言 我国水产养殖业历史悠久，是世界上最早的国家。我国海岸线约1．8万公里， 养殖水域广阔。分布在热带、亚热带、温带，个别水域处于寒带，养殖潜力大。 380万吨，其中养殖产量超过捕捞量，占总产量 2001年，我国水产品总量达到4 62％t‘1，是世界上唯一养殖产量超过捕捞量的国家，在世界上位居领先地位。随 着水产资源的衰减，养殖业在水产业中的地位和作用将越来越重要。目前，中国 和世界渔产量的增加主要依靠养殖生产，世界养殖产量增加80％以上来自中国， 因此，我国水产养殖业的发展对中国和世界渔业产量的增长都起到了巨大的推动 作用。而了解水产经济动物的种质资源和亲缘关系是发展养殖业的前提，是合理 有效的利用宝贵的资源进行杂交育种、获得优良经济性状的基础。以往多数学者 使用的分类依据，主要是根据其形态方面的某些特征来确定。但是，形态和表型 是遗传和环境因素相互作用的结果，不能完全或真实地反映物种的遗传变异，作 为分类学的依据存在稳定性的问题，而从蛋白质及同工酶等方面对物种的分类和 演化进行研究，又可能因这些方面实验所得到的标记是基因表达加工后的产物， 受生物发育阶段和环境条件