N注入选育高产麦角甾醇酵母菌的研究.pdfVIP

中国科学院等离子体物理研究所硕士论文 中文摘要 N十注入选育高产麦角gi醇酵母菌的研究 摘 要 (目前，从酵母菌细胞中提取麦角W,醇，经紫外线照射转变为维生素D2，是生产维 生素D的主要方法。选育高产麦角备醇菌株，对于维生素D的生产具有重要意义。 离子束生物工程学是余增亮先生开创的新交叉学科。低能离子作为新型诱变剂， 具有损伤轻，突变率高，突变谱广的特点。厂一?f 本文通过离子束诱变育种技术选育高产麦角多醇酵母菌。首先研究了不同种类、 不同剂量的低能离子注入对啤酒酵母存活率的影响，重点考察了不同剂量N+注入酵母 菌诱变率和存活率的关系.恤现当能量为20keV，注入剂量为1.3X10}N/cm时，酵 母菌突变率较高，在此注入剂量下，酵母细胞的存活率为 30%;接着，设计了以细胞 形态镜检为初筛指标，以细胞生物量和麦角w醇含量为复筛指标的筛选方案，经过多 次离子注入诱变和大量筛选，获得两株稳定高产菌株，菌株YD11生物量从3g八00m1 提高到4.14g/100ml，克服了原有菌株生物量较低的缺陷，麦角踢醇综合值从7.5提 高到0‘.3，该产量居国内领先水平夕进一步对高产菌株YD11的发酵工艺做了优化， 在综合考虑了培养基和培养条件等因素基础上，初步确定了高产菌株的发酵工气4% 的糖蜜基本培养基，添加1%的葡萄糖，1%的胰蛋白W,0.1%MgSO,7H20,0.1%Ca(K),, 3,500ml三角瓶中装50ml发酵液，接种量10%，培养温度300C，摇床转 起始pH为6. 培养22小时。在此优化条件下，细胞生物量为4.5g/100m1,麦角i}醇含 速240r/min, 量为2.52%,麦角、醇综合值为:1.34万戛启从N注‘入后酵母细胞形态、菌落形态 的改变和DNA变异等几方面，对N`注入酵母菌的生物学效应做了初步探讨，并对未来 工作做了展望 关键词:离子注入，菌种选育，麦角街醇，啤酒酵母 中国科学院等离子体物理研究所硕士论文 英文摘要 StudiesontheBreedingofHighErgosterol-producingYeastStrains byN+Implantation Abstract Ergosterol,asterolextractedrfomyeast,whentreatedwithultra-violetlight,itcanbe convertedtoergocalciferol(vitaminD2).ThisisthemainsourceofmanufacturedvitaminD. Ionbeambioengineeringisanewcross-fieldthatcreatedbyProfessorZengliangYu. Asanewmutagen,ionimplantationhaslowerdamagerate,highermutationrateandwider mutationspecturm. Thebreedingofhighergosterol-producingyeaststrainsbyN+implantationwasstudied inthispaper.First,thesurvivalrateofSaccharomycescerevisiaewasdecreasedgradually withtheincreaseofimplantationiondose.ThecellkillingofSaccharomycesce