丝状真菌发酵法制备甲壳素和壳聚糖的研究.pdfVIP

硬一383131 丝状真菌发酵法制备甲壳素和壳聚糖的研究 摘要 本试验参照国内外学者的论著，对以鲁氏毛霉、米根霉、蓝色犁头霉用发醉法制 备、分离、提取甲壳素和壳聚糖的方法和工艺条件做了系统的研究，得出了较佳的工 艺条件和方法。通过对碳源、氮源与菌丝生成量的单因素试验，确定了各茵种的较优 碳源和氮源;通过对培养基成分的正交试验，优化出了各菌种较佳的培养基组成;通 过对微量促进剂的正交试验，得出了各菌种有效的甲壳素和壳聚糖生物合成徽t促进 剂;通过对各菌种发酵条件的正交试验，优化出了各菌种较佳的发酵控制参数;此外 还做了提取过程中的碱处理条件正交优化试验，酸种类单因素试验和酸提取条件的正 交优化试验，确定了甲壳素和壳聚糖提出优化条件。 (试验结果表明:1.督氏毛霉较佳培养基组成为:果糖2.0%，牛肉膏1.5%,K2HP04 0.075%,MgS041.80X103ppm,N-乙酞荀萄糖胺1.54X103ppm;其较优发醉条件为: 温度28*C，周期48h,pH5.。，摇瓶装液量50ml/250ml.2.蓝色犁头霉较佳培养基组 成为:蔗糖2.5%，牛肉膏1.2%,K2HP040.075%，生物素3.00ppm:其较优发酵条件 为:温度25C，周期48h,pH6.0，摇瓶装液量75ml/250ml.3.米根裸较佳培养基组 成为:果糖2.0%，蛋白膝1.5%,K2HP040.075%，生物素3.00ppm,MgS043.60X103ppm, N一乙酞葡萄糖胺1.54X103ppm;其较优发酵条件为:温度30C，周期60h,pH6.0, 摇瓶装液量50ml/250ml.4.从菌丝体中提取甲壳素和壳聚糖的工艺条件为:①除蛋白 质:氢氧化钠2%,温度115,C，时间1h;②酸处理:盐酸3%,温度80C，时间3h. 5.采用较优发酵提取条件:①鲁氏毛霉甲壳素产tI1.328g/L,壳聚糖产最0.672g/L, 壳聚糖占菌粉干重7%;②蓝色犁头霉甲壳素产R:0.860g/L,壳聚特产量0.287g/L, 壳聚糖占菌粉干重11.2%;③米根霉甲壳素产ti1.123g/L,壳聚糖产量0.622g/L, 壳聚糖占菌粉=-:Ft:9.896.r ‘ 从研究结果可以看出，用丝状真菌发酵法生产甲壳素和壳聚糖具有无毒害、污染 J，、、 简单等优点，但目前用微生物发酵法生产甲壳素和壳聚糖产率不高，要 实现工业化生产尚需寻找新菌种或采用基因工程、透变育种等手段创造出高产甲壳素 和壳聚糖的遗传性状稳定的工程菌，这将是这一领域的研究方向。 关键词丝状真菌发酵法Cs9,*}甲壳素壳聚糖位ma, ︶ ， 一 thePreparingofChitinandChitosanby FermentationwithMycelialFungi Abstact Accordingtotheworkandthesisofresearchersworldwide,wesystematicallystudied themethodsandtechnologyofpreparing,isolatingchitinandchtosanbyfermentationwith fungisuchasMucorrouxianus,Rhizopusoryzae,Absidiacoerulea.Bysinglefactor experimentsofcarbonsourceandnitrogensource,theoptimalcarbonandnitrogensource ofeachstrainweredetermined.Byorthogonalexperiments,theoptimalcompositionofthe culturemediumofeachfungiweredetermined.Byorthogonalexperiments,theeffective tracepromotersforthesynthesisofchitinandchitosantoeachfungiweredetermined.By orthogonalexperiments,thefermentationconditionstoeachstrainwereoptimized.In additionbyorthogonalexperi