BmNPV和AcMNPV egt基因启动子特性及家蚕海藻糖酶基因启动子活性滞育激素调节研究.pdf

摘要 昆虫杆状病毒是漪在的无污染杀虫剂．但是其缓慢的发病致死作_LlJ，极人地限制了它作为杀 虫利的应用·杆状病谗的蜕皮甾体联苷二磷酸葡萄糖基转移酶(egt)基冈为病毒复制的非必需基 因·缺失曙f基田的病毒可以加速宿主昆虫的死亡．提高杀虫效果；而且可在昭f基因启动子下 游插入标记基因域有_l；fj蛋内质基因．有利于重纽病毒的筛选和表达产物的加：【：。 基因启动子活性的调控。 l、BmNPV和^cMNPVegt启动子的特性 具有相似的特性．其转录活性需要病毒因子的反式激活．而且病毒感染厉24h才检测到转录。 2、BmNPV^r3增强egt启动予的活性 在BmNPV和lAcMNPV egt启动子控制的报告基田。卜．游插入BmNPVhr3，车句建带hr3的报告 质粒。瞬时表达分析显示，在体外雨I体内BmNPV hr3分别使egt启动子活性分别增加1200．1600 h才检测到。 和130倍．但锯I扁动子活性仍需要绢毒闲子的反式激活，而且往病毒撼染后18 3、egt基因启动予的功能区 不同长度的BmNPV幕IAcMNPV egt启动子控制的报告基冈表达分柝表明．egt翻译超始位 点ATG上锵．159砩承段包含宿动子的基本结构．但转录话性接近消火；与病毒囡子作用的转录 调控顺式元件主要存在于翻译起始何点ATG上游．159～．309区段内。 4、外源昆虫蜕皮激素和保幼激素对egt基因启动子括性的调控 明显降低昭，启动子活性。相反．在体内每头幼虫注射4-8峙ecdysonc．89r启动子活性提高约 2．6．15倍。JH对Pgf崩动子活性有止调节作_【}j，o．5-2，0Fg／ml培养基或50·150Itg／ml溶液涂布幼 虫俸表分别使启动予活性增加0．75-1．5倍和0．76．4,4倍 5、家蚕和野桑蚕海藻糖酶基因启动子特性 trehalase启动子在同源的Bin5细胞中的转录活性明显高于在异源的Sf21细胞中的插性。 6、滞育激素对象蚕海藻糖酶基因启动子活性的调控 nmol／L范丽内都显著增强家蚕trehalase启动子的活 在Bin5细胞培养基中。DH浓度13．33 nmol／L时无显著的形响- nmol／L增强作)：；j最大．提高约为1．3倍：浓度为50 性，其中以20-27 存在着DH构受体。 关键词：家蚕．轩状嫡毒．egt基因．海藻糖酶基因．启动子特性分析 lI Abstract Baculovlroses are insecticideswithout potential pollution．However,a of primary disadvantage tokill insects has inability limitedtheiruse target rapidlystrongly as are non．essentialfor ecdystemid the of UDP‘glucosyltransferase(egogenes viruses．Host