抗心律失常新药CVT510酶催化合成研究.pdf

抗心律失常新药CV卜510的酶法催化合成研究 摘要 简要概述了手性药物研发的意义和途径以及酶法合成手性药物 的研究进展。总结了有机相酶催化反应的优点与影响因素，同时对核 苷类似物的酶催化合成机理和底物特异性做了简要综述。介绍了手性 抗心律失常新药CVT-510的药理、现有的化学合成法和临床研究现 状，阐述了研发酶催化合成CVT-510的意义及理论依据。 CVT-510由美国CV Therapeutics公司研究开发，是极具开发前 线中，关键为合成两重要光学活性中间体3-(S)．氨基四氢呋喃和6一 氯嘌呤核苷。 为了优化获得3．(S)．氨基四氢呋喃(中间体一)，我们以两步化 学合成法得到酶催化反应前的中间体N．苯甲酸甲酰基．3．氨基四氢呋 喃，并通过改进实验操作将其产率从文献报道的51％提高到63％。 利用有机相酶催化水解合成了第一个手性中间体3-(S)．氨基四氢呋 喃。为获得更高的转化率和光学收率，我们从八种文献涉及到能催化 水解酰胺键和酯键的酶(木瓜蛋白酶两种，枯草杆菌蛋白酶和猪肝酯 酶各一种，脂肪酶四种)中筛选出木瓜蛋白酶，并优化了反应条件： 最优有机溶剂为四氢呋喃和正丁醇；最适反应温度为35．40C；此时 其最高底物转化率在25％以上，目标对映体过量值(ee值)超过15％。 为了优化获得第二个中间体6．氯嘌呤核苷，我们采用经过破碎的 瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus N-脱氧核糖转移酶粗酶液水相催化碱基交换反应，并优化了超声波破 碎条件和水相催化反应条件。以超声波破碎细胞的优化条件为输出功 射时间4s、间隙时间6s)。水相催化反应的优化条件为底物浓度鸟苷 6．0； 率接近50％，比化学合成法总收率高15％以上，同时化学合成法的 四步缩短到了生物化学法的一步反应。 CVT-510， 关键词：抗心律失常新药， 3-(S)一氨基四氢呋喃， 6一氯嘌呤核苷， 酶法合成 n ENZYMATICSYNTHESISOFNEW DRUG：CVT-510 ABSTRACT Thedissertationreviewedhowtomakechiral howto drugs，especially the andalso the preparedrugsbyenzymes discussedmechanismof enzymatic ofnucleotide and synthesis analogues．Theadvantages of in mediaandfactorswhich enzymecatalysisorganic affect disadvantages the of in mediawerealso biocatalysisorganic discussed．The efficiency researchesandchemical ofCTV-510were pharmacology,clinic synthesis introduced．Most