溃结汤对大鼠溃疡性结肠炎治疗作用及肠粘膜NFκB影响研究.pdfVIP

中文摘要 溃结汤对溃疡性结肠炎大鼠治疗作用及 肠粘膜NF-v,B影响的研究 摘 要 目的：溃疡性结肠炎(UC)的病因及发病机制目前尚 不完全清楚，但是和UC相关的细胞及分子水平的机理研 究已经有了很大进展。许多证据表明细胞因子在UC的发 生和发展中起重要作用。各种肠道炎症动物模型研究显 示，抑制前炎症细胞因子可以缓解肠道炎症。在上述研究 基础上，针对UC的合理的细胞因子靶目标治疗已经建立， 的治疗策略在临床实验业已启动。最近的研究集中在调节 细胞因子产生和激活的转录因子上，包括K基因结合核因 发病中的确切作用尚不清楚，进一步的研究必将为治疗 UC提供一些新的靶目标。 Rogler等利用免疫组化和电泳迁移率改变分析技术 首次报道NF．v．B在UC患者炎症肠粘膜高表达，且主要定 位于巨噬细胞和肠粘膜上皮细胞，指出NF．KB可能在调 节UC炎症相关因子的基因表达上起重要作用。Murano 等在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的鼠结肠炎模型中证实肠 腔内应用NF．KB反义寡聚核苷酸对UC治疗有效。甘华田 等在研究UC患者肠粘膜NF．vd3的活化以及柳氮磺胺吡啶 中炙摘要 活性和表达的增加可能与UC的发生、发展有关；(2)糖皮 质激素和SASP的抗炎作用可能是通过抑制NF—r,B的活性实 现。NF-r,B可能为UC新药的研究开发提供一个有价他的靶 目标。 目前，国内未见NF．r,B在UC实验研究中作用的报道。 本实验旨在探讨UC大鼠肠粘膜NF．r,B的活化以及本科自拟 中药溃结汤(ⅪT)对其影响和对UC的治疗作用。 氯苯+乙酸)制备细胞免疫反应性UC大鼠模型。 2．动物分组及处理：取已造模成功Wistar大鼠40只，随 机均分为模型组、KJT低剂量组、K．rr高剂量组、SASP组， 组以SASP0．29／kg用蒸馏水制成悬液灌胃，模型组及正常对 照组给予等量生理盐水灌胃。各组大鼠均灌胃2周并观察大 射麻醉，剖取距肛门2-10em结肠，共8cm沿肠系膜缘剪开肠 腔，用生理盐水清洗干净，称量结肠重量，而后平展于8倍 放大镜下，进行肉眼观察和形态学分析，然后，用已消毒锋 利刀片切取5x 10mm大小的结肠组织(模型组包括部分结肠 溃疡创面在内)，浸泡于40／o多聚甲醛，用于HE及免疫组化 染色。另外，切取3×3 mm大小的结肠组织(模型组包括部分 结肠溃疡创面在内)，浸泡于2％(pH7．2．7．4)戊二醛中固定， 置于4C冰箱．用于SEM样品制备。 中文摘要 3．观察指标：(1)结肠重量(2)大体形念粘膜损伤程度 损伤观察；(4)NF．心p65免疫组化染色，图像分析系统处理。 结果：1．大鼠的一般情况、结肠组织大体观察、结肠重 量和肠粘膜损伤程度评分：(1)一般情况：50只造模大鼠于 造模起1．2周，相继出现局部皮肤炎症损害及结痂，大鼠毛色 失去光泽，精神倦怠甚至萎靡，活动及进食明显减少，体重 下降等变化。造模完成后5．10天，所有造模大鼠开始腹泻， 其肛周污秽、粪便恶臭，并出现粘液脓血便或粪便稀溏等UC 常见症状，可持续12．16周。正常组无上述变化。(2)结肠组 织大体观察：正常组肠粘膜光滑，无水肿、出血、溃疡、肠 壁增厚等表现。模型组可见肠粘膜充血、水肿、糜烂、坏死、 组在用药两周后上述变化均较模型组减轻。(3)结肠重量(曲： 明显差异(PO．05)。 2．HE染色病理观察：(1)对照组表现为正常结肠结构： 肠壁由粘膜层、粘膜下层、肌层和浆膜等四层组成。粘膜表 面平滑，无环状皱襞和绒毛，但有很多肠腺开口，固有层可 中文摘要 见大量呈直管状、紧密排列的肠腺和部分孤立淋巴小结；粘 膜下层由疏松结缔组织构成，含有较多淋【卫细胞，川。见血管、 淋巴组织和神经纤维；肌层由内环行和外纵行两层平滑肌组 成；浆膜完整。(2)模型组可见粘膜、粘膜下层甚至肌层火 量炎性细胞浸润，溃疡边缘腺体增生或呈不典型增生，杯状 细胞减少，隐窝脓肿形成，粘膜下层出血、水肿，毛细血管 疡愈合，粘膜腺体增生好转，腺体杯状细胞增多，隐窝脓肿