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摘要
植物响应盐胁迫的信号转导过程是一个巨大而复杂的网络,目前有很多关键的
醇磷脂信号系统中的一个关键酶,也是与植物耐盐性相关的候选基因。该信号系统
在动植物细胞的生长发育及介导胞外信号的跨膜传递中发挥着重要的作用,其作用
的分子机制已经成为目前研究的热点。随着2000年拟南芥基因组测序工作的完成,
的生理过程,可以为PLC的功能研究和作用机制的探讨提供重要的依据。通过基因
改造为改良农作物的耐盐性状提供理论基础,进而为提高农作物产量和改善盐碱地
区生态环境做出贡献。
遗传学的方法,通过遗传转化、RT.PCR等分子生物学及组织化学分析并结合生理
生化指标检测等试验手段,进行PLC参与调节植物耐盐性的功能研究。
体进行筛选和鉴定。用Kan7平板筛选与PCR的方法结合鉴定得到了两个亚型基因
缺失突变体,P4为超表达突变体。
存活率,发现P3和P4两个突变体的萌发速率在NaCl处理条件下明显快于野生型,
在100mM
进一步检测了两种突变体在盐胁迫条件下脯氨酸、SOD、POD等含量的变化,发现
两种突变体脯氨酸上升的幅度小于野生型拟南芥,而SOD、POD活性水平均高于野
节。
取得遗传转化的阳性植株,经GUS染色和激光共聚焦显微镜观察,结果表明AtPLC3
与AtPLC4均在根及叶片有较高水平的表达,这一结果也为前面的主根和侧根的表
型提供了的试验证据;激光共聚焦显微镜观察结果发现两个亚型的蛋白定位于质膜
上。这些定位信息为进一步研究两个亚型参与拟南芥盐胁迫应答调节的作用机制的
研究提供了基础。
thaliana);磷脂酶C(PLC);盐胁迫
关键词:拟南芥(Arabidopsis
Functionalof
AtPLC3andAtPLC4insaltstress
analysis responseofArabidopsis
thaHana
Author:Liu
Hai-long
andmolecular
Major:Biochemistry
biology
Adviser:Pan
Yah-3run,WangDong-mei
Abstract
tosaltstress transductionin isa and
Response signal planthugecomplexnetwork,
thereare tobe
manykeysignal
componentsdeeply
a which
bisphosphate-specific—phospholipaseC(PIP2·PLC)islipid-associated
enzyme
to
employsPIP2produceinositol—l,4,5·trisphosphate(IP3)and
Thesetwo substancescrucialrolesin extracellularstimuliand
messenger play ampli研ng
various caused
mediatingphysiologicalproces
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