山西省吕梁市石楼县石楼中学生物选修3：1.1《DNA重组技术的基本工具》学案.docVIP

【本节重难点】 重点：DNA重组技术所需的三种基本工具的作用 难点：基因工程载体所需要具备的条件 【典题分类精析】 例1．（2005高考广东）以下有关基因工程的叙述，正确的是 （ ） A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的 C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强 分析：本题考查的知识点是基因工程的。基因工程是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造(目的性强)和重新组合(基因重组)，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物.但并不是所有的基因产物对人类都有益的．在基因工程中用来完成基因的剪接的工具是 A．限制酶和连接酶 B．限制酶和水解酶C．限制酶和运载体 D连接酶和运载体．有关基因工程的叙述正确的是 A．限制酶只在获取目的基因时才用B．重组质粒的形成是在细胞内完成的 C．质粒都可以作为运载体 D．蛋白质的氨基酸排列顺序可以为合成目的基因提供线索 A．细菌质粒 B．噬菌体 C．动植物病毒 D．细菌核区的DNA．（1）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上1个酶Ⅱ的切点。 ___________________________ ②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后形成的黏性未端。_____________________ ③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的________________________________________________________ 分析：本题主要考察黏性末端的知识。解答本题的关键是理解限制酶的特点。在切割目的基因和运载体时，一定要使用同一种限制性内切酶，这样，切出的切口才一样，才能进行碱基互补配对连接起来。两个黏性末端只要一样就可以进行碱基互补配对，再通过DNA连接酶连接起来。 答案：（1） 点评：限制酶所识别的是特定的碱基序列，并在特定部位进行切割，限制酶不同，所识别的碱基序列不同，黏性末端不同。但不同的粘性末端有时是可以进行拼接的，如：黏性末端。两者不要混淆。 【针对性练习】 1．实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的A．酶的高效性 　B酶的专一性C．酶的多样性 D．酶的催化活性受外界条件影响．有关基因工程的叙述中，正确的是 DNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来　制性内切酶可用于目的基因的获得 目的基因须由运载体导入受体细胞　　　D.人工合成目的基因不用限制性内切酶 A．B．．D．DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？ A. BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B. BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C. EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D. BamHI和BglII；末端互补序列—GATC— 16．在DNA 测序工作中，需要将某些限制性内切核酸酶的限制位点在 DNA上定位，使其成为 DNA 分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶 HindⅢ，BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个 4kb（1kb即1千个碱基对）大小的线性DNA 分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如下图所示。 据此分析，这两种限制性内切核酸酶在该DNA 分子上的限制位点数目是以下哪一组？ A．HindⅢ1个，BamHⅠ2 个 B．HindⅢ2个，BamHⅠ3个 C．HindⅢ2个，BamHⅠ1 个 D．HindⅢ和BamHⅠ各有2 个 17.两个核酸片段在适宜的条件下，经X酶的作用，发生下述变化，则X酶是 A.连接酶 B.RNA聚合酶 C.DNA聚合酶 D.限制酶 18．基因工程中涉及多种工具酶： （1）限制性内切酶是一类能识别特定核苷酸序列并在特定位点切割双链DNA的“基因剪刀”。被限制酶识别的序列往往正反读顺序相同，断裂的位置交错，但又是围绕着一个轴线（对称轴）对称排列，如下左图。PstI和EcoRI都是限制酶。请补全下右图中的互补链，画出对称轴以及切割后的产物。