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***教学目标
1.简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。
2.列举植物细胞工程的实际应用。
3.尝试进行植物组织培养。
***教学重点
植物组织培养的原理和过程。
植物体细胞杂交的原理。
植物细胞工程应用的实例。
***教学难点
1. 植物组织培养的实验。
☆细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。
一、植物细胞工程的基本技术
1.基本原理/理论基础:植物细胞具有全能性(原因:每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因)。属于无性繁殖,现已推广应用。
☆细胞全能性比较:受精卵生殖细胞未分化细胞成熟细胞
练习:植物细胞表现出全能性的必要条件是
实例:【实验 胡萝卜的组织培养】方法与步骤
1.清洗材料:将胡萝卜用自来水冲洗干净,用刮皮刀除去表皮1-2mm,横切成大约10mm厚的切片。下步骤全部在无菌条件下进行。胡萝卜片经70%乙醇处理秒钟后,用无菌水冲洗,再用饱和漂白粉溶液浸泡分钟,无菌水冲洗~3次。胡萝卜胡萝卜将胡萝卜组织小块接种培养基表面。将培养物一部分置于C温箱中暗培养另一部分到光照培养室中进行培养,以比较光照和暗培养对愈伤组织诱导的反映。观察愈伤组织外植体表面开始变得粗糙,有许多光亮点出现,这是愈伤组织开始形成的症状。愈伤组织胡萝卜愈伤组织原生质体A 杂合原生质体
植物细胞B原生质体B 杂种细胞再生出细胞壁
杂种植株 再生出小植株 愈伤组织
4.人工诱导的方法
①物理方法:离心、振动、电激等
②化学方法;聚乙二醇(PEG)
5.意义:克服远缘杂交不亲和的障碍,打破物种之间的生殖隔离、扩大遗传重组范围。
三、植物细胞的实际应用
1. 快速繁殖、培育无病毒植株
2.细胞培养生产药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂(发酵罐中诱导分离的愈伤组织)
3.人工种子:胚状体 + 人工种皮
4. 转基因植物的培育
四、植物细胞杂交与传统细胞杂交比较:
传统杂交细胞杂交
依据杂种优势细胞全能性、原生质体融合
过程自然发生,在母体完成胚发育人工诱导融合,需组织培养
本质精、卵两种生殖细胞结合,完成遗传物质的重新组合不同生物的体细胞融合,完成和遗传物质的融合
优点杂种第一代生长整齐、植株健壮、产量高、抗虫抗病能力强克服远源杂交不亲和障碍,实现不同种间的杂交
缺点存在生殖隔离;杂种第二代会出现生长不齐、产量下降等现象很多理论、技术问题未解决,距离推广应用有一定差距
目的获得杂种优势,提高产量获得优良性状
意义自然发生、方便生产扩展了用于杂交的亲本组合
应用范围种内种内、种间均可。
五、课外阅读
植物培养的类型
①植株培养。指以具备完整植株形态的材料(如幼苗和较大的植株)为外植体的无菌培养。
②胚胎培养。指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。
③器官培养。指以植物的根,茎,叶,花,果等器官为外植体的离体无菌培养,如根的根尖和切段,茎的茎尖,茎节和切段,叶的叶原基,叶片,叶柄,叶鞘和子叶,花器的花瓣,雄蕊(花药,花丝),胚珠,子房,果实等的离体无菌培养。
④组织培养。指以分离出植物各部位的组织(如分生组织,形成层,木质部,韧皮部,表皮,皮层,胚乳组织,薄壁组织,髓部等),或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的组织培养。
⑤细胞培养。指以单个的游离细胞(如用果酸酶从组织中分离的体细胞,或花粉细胞,卵细胞)为接种体的离体无菌培养。
⑥原生质体培养。指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。
【文献资料】
高考学习网:
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