RhoC对卵巢癌侵袭转移影响.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………．1 英文论著摘要………………………………………………………………………4 二、英文缩略语………………………………………………………………………。7 三、论文 论文一 ．▲．￡．—jL· 日U舌…………………………………………………………………………………………………………·8 材料与方法………………………………………………………………………。9 实验结果…………………………………………………………………………14 讨论………………………………………………………………………………………………………．．24 论文二 —1L．】一 日U舌………………………………………………………………………………………………………··30 材料与方法………………………………………………………………………30 实验结果…………………………………………………………………………36 讨论………………………………………………………………………………………………………。43 结论………………………………………………………………………………………………………．．46 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………47 五、参考文献…………………………………………………………………………48 六、附录 综述………………………………………………………………………………………………………。51 致谢………………………………………………………………………………64 个人简历…………………………………………………………………………65 袭转移的影响 目 的 卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤，恶性度高，易于盆腹腔广泛种植转 移，预后极差，5年生存率仅为35．38％。深入研究卵巢癌侵袭转移机制对于改善 卵巢癌的总体预后有重要的意义。卵巢癌的侵袭和转移是一个多步骤、多阶段、 多基因的复杂过程。主要涉及粘附、降解、移动、血管生成等方面，其中涉及的 多个分子事件与Rho蛋白有关。Rho蛋白在细胞运动及肿瘤侵袭中的作用研究较 为广泛。 Rho蛋白为GTP酶，能结合并水解鸟苷酸，使其在活性型(GTP结合)与失活 型(GDP结合)之间循环。当Rho与GTP结合时，能作用于下游效应分子或靶蛋 白，从而诱发细胞反应。RhoC是Rho基因家族的一个成员，在细胞的信号转导通 路中作为信号转换器或分子开关，作用于细胞骨架或其靶蛋白而产生多种生物学 效应。研究发现RhoC可能通过以下几方面调节肿瘤细胞的侵袭和转移： 1、通过调节肌动蛋白细胞骨架参与调节细胞运动和迁移。2、促进细胞外基质的 降解。3、促进肿瘤血管生成 已有研究表明，在卵巢癌中，RhoC的高表达和卵巢癌的分期侵袭正相关， 但RhoC促进卵巢癌侵袭转移的机制，是否通过调节基质金属蛋白酶MMP降解细 胞外基质，是否通过RhoC／ROCK信号转导通路提高VEGF等血管生成因子的表 达促进肿瘤血管生成，未见报道。我们以卵巢癌组织和卵巢癌细胞为研究对象，探 讨RhoC在卵巢癌组织中的鹅表达和卵巢癌侵袭转移的关系。同时探讨siRNA干 扰技术对RhoC的抑制作用，及RhoC对卵巢癌细胞生物学行为的影响。 方法 表达及临床意义 1、采用RT-—PCR法检测上皮性卵巢癌组织中RhoCmRNA的表达情况， Western 床病理学指标的关系 2、采用RT--PCR法检测上皮性卵巢癌组织中ROCK．I mRNA的表达情况， Western 巢癌临床病理学指标的关系 3、采用RT--PCR法检测上皮性卵巢癌组织中VEGF mRNA的表达情况， Western blot方法检测VEGF蛋白的表达，分析VEGF的表达与上皮性卵巢癌临 床病理学指标的关系