1、2型星型胶质细胞的分离纯化培养及其生物学特性研究.pdfVIP

1、z型星形胶质细咆的分离纯化培养及其生物学特性研究 中英文摘要 l,2型星形胶质细胞的分离纯化培养及其生物学特性研究 ~ 摘 要 星形胶质细胞(简称星形细胞)在各种神经胶质细胞中数目最多 分布最厂，‘担负了神经胶质细胞的大部分功能:如支持、修复与再生、 吞噬与保护、运输营养、参与构成血脑屏障、摄取化学递质和分泌功 能等。’星形细胞在神经系统的正常生理活动和神经病理学过程中皆有 极其重要的作用。根据星形细胞发生分化的 “双谱系学说”，可分为 1型星形细胞(T1A)和2型星形细胞(T2A)两型。两型星形细胞分别由 两种不同抗原表达的祖细胞发育分化而来，TIA起源于独立的缺乏 A2135抗原的祖细胞，T2A和少突胶质细胞来自表达A2B5抗原的双潜 能细胞-0-2A祖细胞。， 目的:建立适合本实验室条件的分离纯化TIA,T2八的方法，并 探讨其生物学特性，为实验室的后续研究奠定基础。 方法:采用振荡培养法结合差速贴壁法分离纯化’RA,r2A;应用 兔疫细胞化学方法，观察0-APP在TIA,T2A的表达情况;利用分离 纯化的H『A,T2A制备条件培养液，观察条件培养液对PC12细胞`I长 情况的影响，以kiTT法检测PC12细胞活力。 1.2型星形胶质细胞的分离纯化培养及其生物学特性研究 中英文摘要 结果:(约采用振荡培养法可分离r1A和0-2A祖细胞，获得较 纯的T1八;(2)差速贴壁法进一步纯化0-2A祖细胞，八2B5抗体标记 阳性;(3)0-2A祖细胞在 10-20%高浓度血清诱导下分化为 12‘A; (4) r1A和r’2A形态学t_存在差异;(5)1IA表达0-APP,T2A不表达p -APP;(6)TIA条件培养液作用组和 ’r2A条件培养液作用组PC12细 胞突起T-长明显，OD值分别由0.278提高到 0.512(P0.001)和 0.566(pO.001)，而对照组PC12细胞则突起生长不明显。 结论:(1)采用振荡培养法，结合差速贴壁法，建立了适合木实 验室条件的分离纯化TIA,T2A的方法。(2)TIA,T2A形态学上存在 差异。(3)1lA表达0-APP,T2A不表达0-APP，提示了TIA可能与 AD发生发展过程中0-AP的沉积密切相关。4 ) ( TtA,T2A条件培养 液对PC12细胞有刺激生长作用，说明TIA, 对中枢神经再生具有朴 A Z 1 积极的促进作用。(5)0-2A祖细胞及TIA,︹ A Z e s 的研究对神经系统退 行性疾病的治疗可能具有重要的应用价值。 关键词:星形细胞、细胞谱系、细胞培养、0一淀粉样蛋白前体、PC12 细胞 ]、2型星形胶质细胞的分离纯化培养及其生物学特性研究 ,i,英文14要 TheStudy on thePurification Cultureand BiologicalCharactersofType 1andType 2 Astrocytes ABSTRACT AmongneurogliaIcells,astrocytesarethemostinnumber and distrhution. Astrocytes take on most functions of neurogIiaIce11s’s, such as supporting, repairing and regeneration,theyplay importantrolesinphysiologyand pathology ofnervoussystem.According to the theoryof astrocytes[ineages,astrocytesaredivideintotwotypes:type 1astrocytes(TIA)andtype2astrocytes(f2A). Objective:ro establish themethod ofpurific