增强子位点突变对GFP报告基因表达影响及生物信息学分析.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………………8 研究论文 增强子位点突变对GFP报告基因表达影响及生物信息学分析 引言·…………“…………………………………………………………9 第一部分 短序列增强子中3个T位点突变对GFP报告基因表达影响 前言………………………………………………………………………10日!J舌“一“””“………”“”””…””…”“““…”……“”“””““““…lU 材料与方法………………………………………………………………10 结果···…………………………······…·…………······…··……………18 附图············…………······…·····…··…··········…···········………··21 附表··………………·……………………………………………………34 讨论············……······…………··………………··……·…·…·········38 小结……······………………··………·……······…··…··……………··39 参考文献…………………………………………………………………40 第二部分 生物信息学分析HeLa细胞RNA片段 前言··………·………………·…·……………·…………………………42日U舌“…”“…………………”……一“……”””…“…“…““………‘42 材料与方法………………………………………………………………42 结果·····…·······……………………-·…······…………··……···…·…·44 附表·····…···………·······…··……··…·…···……···……···…………·46 讨论…··………···……··…………·····………………···…··…·····…··53 刀、结·········…···…·········………·····…………………·····…···…·…·54 参考文献…………………………………………………………………54 结j沧···…··…·······………………·····…………····…··…………·······……56 综述非编码RNA生物学功能及对肿瘤等疾病的影响…………………57 致谢·…····………···……······…·……··…·…………………··………·…···71 个人简历………………………………………………………………………72 中文摘要 增强子位点突变对GFP报告基因表达影响及生物信息学分析 摘 要 基因表达的机理尚有许多值得研究之处。本研究室前期工作证明， 5’ 7 7 为什么类似的序列活化基因作用不同，为弄清碱基片段和单个碱基在 7． 活化基因中的作用，我们对22R序列进行突变，发现AA(5 AA中的其他T碱基是否也参与活化基因过程呢?于是又对AA序列中的 报告基因表达的影响。 设计带有适当酶切位点的引 方法：1引物和作为模板的DNA片段 物和DNA片段模板，委托DNA合成公司合成。表1列出本文中合成的 引物和作为模板的DNA片段。 2重组质粒构建 以人工合成的带有突变位点的序列为模板，用带有 适当酶切位点的引物扩增目的片段，酶切后插入pEGFP．