大鼠卵巢组织玻璃化冷冻及自体移植实验研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………5 研究论文大鼠卵巢组织玻璃化冷冻及自体移植的实验研究 前言……………………………………………………………………．．1l 刖舌……………………………………………………………………··II 第一部分大鼠卵巢组织两种玻璃化冷冻保存方案的比较研究 材料与方法……………………………………………………………．13 结果……………………………………………………………………．17 乡日木……………………………………………………………………·-， 附图……………………………………………………………………．18 附表………．．…………………………………………………………．．20 讨论……………………………………………………………………．2l 小结……………………………………………………………………．22 第二部分大鼠卵巢组织自体移植的实验研究 材料与方法………………．．j…………………………………………．23 结果……………………………………………………………………．26 附图……………………………………………………………………．27 附表……………………………………………………………………．30 讨论……………………………………………………………………．32 小结……………………………………………………………………．33 参考文献………………………………………………………………．34 结论…………………………………………………………………………．37 综述卵巢组织玻璃化冷冻的研究进展…………………………………．38一 致谢…………………………………………………………………………．50 个人简历……………………………………………………………………．51 中文摘要 大鼠卵巢组织玻璃化冷冻及自体移植的实验研究 摘 要 随着肿瘤综合治疗的进步，年轻女性肿瘤患者的生存率得到了很大提 高。但在治疗癌症的同时，也带来了许多副作用，如卵巢早衰、正常卵巢 的切除，丧失内分泌及生育能力等等。由于部分患者处于生育年龄，如何 保存生育能力成为亟待解决的问题。 目前有三种方法来保存患者的生育能力：即胚胎冷冻，卵母细胞冷冻 及卵巢组织冷冻。胚胎冷冻的只适用于已婚女性，而卵母细胞冷冻可用于 单身女性，但妊娠率很低。而且这两种技术操作过程复杂，且需长时间促 ／ 排卵及取卵，另外使用促排卵药物会使血清雌激素水平升高，禁用与一些 雌激素敏感性恶性肿瘤患者。而卵巢组织冷冻是未成年人及未婚女性的唯 一选择，因为这一方法不需要配偶，亦不需要促排卵药物，可以在任何周 期取材，尤其适合需要及时治疗的肿瘤患者。 卵巢组织冷冻保存有三种方式：慢速程序化冷冻、常规玻璃化冷冻 (convemional cover 其操作过程复杂，需要程序冷冻仪，费用高。而常规玻璃化冷冻较之更为 简单、经济，冷冻效率更高，因而更为普遍。中国台北Chen等报道的直 接覆盖玻璃化冷冻法，将小鼠卵巢组织与液氮直接接触，进行冷冻保存， 该法降温速率可达15000℃／min，冷冻效果优于其他常规的玻璃化冷冻方 法。但该方法目前研究尚少，也没有展开应用。 冷冻保存卵巢组织的目的为将卵巢组织移植回体内·，一定程度上恢复 冻融卵巢组织的内分泌及生育功能。然而在移植过程中，新生毛细血管形 成前，会造成缺血再灌注损伤从而丢失大量卵泡。基于这些，有人提出不 同的策略以优化移植结局，如移植较小的组织块，或在移植前使用FSH、 维生素E和VEGF来预处理动物等