甲泼尼龙减轻水通道蛋白4抗体对体外培养鼠皮层星形胶质细胞和神经元毒性作用.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………l 英文摘要……………………………………………………………………4 研究论文 甲泼尼龙减轻水通道蛋白4抗体对体外培养鼠皮层星形胶质 细胞和神经元的毒性作用 引舌……………………………………………………………………．．7引言……………………………………………………………………．．7 第一部分水通道蛋白4抗体阳性血清对原代培养鼠皮层细胞的毒性作 用 前言………………………………………………………………………．8日U舌……………………………………．．………………………………．．8 材料与方法………………………………………………………．……9 结果……………………………………………………………………．．12 附图……………………………………………………………………13 附表……………………………………………………………………14 讨论………………………………………………………………………．．15 小结………………………………………………………………………．．17 第二部分 甲泼尼龙对水通道蛋白4抗体诱导的大鼠皮层细胞毒性的 保护作用 前言………………………………………………………………………18 日U吾………………………………………………………………………l芍 材料与方法……………………………………………………………19 结果……………………………………………………………………20 附图……………………………………………………………………22 附表……………………………………………………………………23 讨论……………………………一……………………………………．24 小结………………………………………………………………………25 参考文献………………………………………………………………26 结论…………………………………………………………………………30 综述水通道蛋白4和中枢神经系统疾病………………………………．．3l 致谢…………………………………………………………………………40 个人简历……………………………………………………………………41 中文摘要 甲泼尼龙减轻水通道蛋白4抗体 对体外培养鼠皮层星形胶质细胞和神经元的毒性作用 摘 ’要 目的：视神经脊髓炎(】沁uromyelitisoptica，ⅫⅥO)，是一种主要侵犯视 神经和脊髓的中枢神经系统炎性脱髓鞘性疾病。多年来医学界对NM0是 多发性硬化(Multiple 越多的证据表明AQP4抗体不仅是ⅫⅥ0区别MS的特异标志物，而且在 NM0发病机制中发挥重要的作用，ⅫⅥO是一种抗体介导的体液免疫性 的同时也降低AQP4抗体滴度；病理研究表明ⅫⅥ0新鲜病灶中广泛缺乏 星形胶质细胞和AQP4染色；体外研究也证实AQP4抗体和星形胶质细胞 特异性的结合导致AQP4内陷，增加血脑屏障的通透性，损害钠依赖性谷 氨酸传递，产生补体依赖性细胞毒性。但这些体外研究多为纯星形胶质细 胞培养或AQP4转染细胞培养，AQP4抗体对混合细胞培养中星形胶质细 胞和神经元的毒性作用尚无研究。另外临床研究已经证实小剂量强的松口 服能减少NMO的复发，提示肾上腺皮质激素可能通过免疫抑制作用、抗 炎、减轻细胞水肿等发挥其对NM0的治疗作用。故本研究通过大鼠皮层 原代细胞培养，首先观察不同滴度的NMO患者AQP4抗体阳性血清对大 鼠皮层神经细胞的毒性作用；其次探讨甲泼尼龙对AQP4抗体诱导的神经 毒性是否有保护作用。 方法： 1原代培养3天的新生Wistar大鼠大脑皮层神经细胞，分别加入正常对 培养6小时后使用细胞免疫荧光染色法观察各组星形胶质细胞和神经元 的形态学及数量变化。 2原代培养3天的新生Wistar大鼠大脑皮层神经细胞，随机分为4组： 中文摘要 +1：1000血清组，分别加入对应的血清或／和甲泼尼龙，培养6小时后使用 细胞免疫荧光染色法观察各组星形胶质细胞