下丘脑室旁核—垂体—甲状腺胃动素表达、调控及对胃运动影响研究.pdf

中文摘要 目的s 观察胃动素(MTL)在下丘脑室旁核(PvN)、垂体及甲状腺的表达，比较甲状腺 恶性肿瘤组织中表达的差异及临床意义； 探讨下丘脑PVN．垂体．甲状腺对甲状腺胃动素分泌及胃运动的调控，以及甲状腺 胃动素对下丘脑PVN、垂体MTL表达的反馈调控； 胞增殖、侵袭和转移中的作用和临床意义。 方法： 1．采用荧光免疫组化技术，观察下丘脑PVN、垂体及甲状腺内MTL的定位和定性表 PCR)、Southern 达；采用实时荧光定量PCR(Real．time Blot和分子克隆、荧光免 疫组化双染等技术，观察人甲状腺和小肠MTL前体mRNA基因序列异同；比较 MTL前体mRNA和蛋白在正常甲状腺和甲状腺良、恶性肿瘤组织中表达的异同。 2．采用在体胃运动和放射免疫方法，观察刺激／损毁下丘脑PVN、摘除垂体或甲状腺 PCR法，观察电刺激／损毁下丘脑 腺素(T4)和MTL含量的改变；采用Real-time PVN及摘除甲状腺对下丘脑．垂体．甲状腺MTL前体mRNA表达的影响；采用免疫 组化法，观察刺激／损毁下丘脑PVN对甲状腺MTL表达的改变，及甲状腺摘除对 PVN内c．Fos表达的影响。 blot、Western 3．采用Southern blot和荧光免疫细胞化学技术检测Tr细胞内MTL mRNA和蛋白表达，应用Small 实验和划痕实验分析MTL基因表达对TT细胞增殖、侵袭和转移能力的影响。 结果： 1．大鼠下丘脑PVN、垂体、甲状腺及人垂体、甲状腺组织均可见MTL免疫阳性细胞 的表达，且在甲状腺MTL与降钙素(CT)共表达于同一细胞，即甲状腺C细胞。 因序列(旦￡!1231垒，NCBI，美国)相同。 3．正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织内均有MTL和MTL前体mRNA的表达，其中甲 状腺髓样癌MTL及其前体mRNA的表达显著高于正常甲状腺、甲状腺乳头状癌、 滤泡癌、嗜酸性腺瘤及结节性甲状腺肿(Po．01)；而甲状腺乳头状癌和滤泡癌MTL 及其前体rnRNA的表达明显低于正常甲状腺、嗜酸性腺瘤及结节性甲状腺肿 (P0．05)；结节性甲状腺肿和嗜酸性腺瘤与正常甲状腺相比，MTL及其前体 mRNA的表达无显著差异(P0．05)。 4．下丘脑PVN对胃动素分泌及胃运动的影响结果显示，电刺激下丘脑PVN可使大鼠 显著增加(P0．05)，胃窦MMCIII期样收缩明显增强(Po．05)，该作用可部分被 状腺摘除假手术组相比，其血浆MTL含量显著降低(Po．05)，胃窦MMCIII期 MMC III期样收缩明显减弱(Po．05)。 5．垂体对胃运动的影响研究结果显示，在垂体摘除大鼠，MMCIII期收缩频率显著减 III期收缩频率显著降低(P0．05)。 6． 甲状腺对胃动素的分泌、胃运动的影响以及对下丘脑PVN、垂体MTL表达的反馈 调控研究显示，甲状腺摘除后，大鼠血浆MTL含量显著减少(2d，P0．01；4d， P0．05)，下丘脑和垂体MTL HI (2h，P0．05)。 7．TT细胞MTL的表达、分泌和调控研究显示，TT细胞内有大量MTL免疫阳性物 ‘ 细胞的增殖、侵袭和转移(P0．05)。 结论： 1． 2．人甲状腺和人小肠MTL前体mRNA基因序列相同。 3．MTL及其前体mRNA在甲状腺髓样癌呈高表达，而在甲状腺乳头状癌和滤泡癌呈 低表达。 4．MTL参与下丘脑PVN．垂体．甲状腺胃运动的调控，甲状腺可反馈影响下丘脑、垂 体MTL的表达。 袭和转移能力。 博士研究生：郭菲菲(生理学) 指导教师：徐珞 关键词：胃动素；下丘脑；垂体；甲状腺；胃运动 onGastric The