植物的快速繁殖技术与植物脱毒.ppt

第九章 植物快速繁殖技术与植物脱毒 第一节 植物离体快速繁殖 一、植物离体快速繁殖技术 是植物生物技术的一个重要组成部分; 将来自优良植株的茎尖、腋芽、鳞片、叶片等器官、组织或细胞进行离体培养，在短期内以更快的速度获得遗传上稳定一致的大量个体。 这种快速繁殖方式与传统无性繁殖方式的区别在于繁殖速度快，不受自然的干扰，使育苗工厂化。 二、植物快速繁殖意义 1、离体无性繁殖由于繁殖体系是建立在体细胞的基础上，繁殖过程在人工控制的环境条件下，所以既不会造成性状分离，也不会产生退化，同时还避免了病虫害的浸染，从而可以很好的保持品种优良特性。是异交作物和无性繁殖品种繁育的理想途径。 2、 快速繁殖新/优良品种可以迅速应用。离体繁殖因为周期（1－3个月），不受季节限制，繁殖系数高（几十到几百倍），因此其繁殖速度是任何其它方法所不能比的，所以离体繁殖又称为快繁（rapid clonal propagation). 3、产生无病毒植株，防治品种退化 4、节约耕地，提高农产品的商品率 5、便于运输 常规的营养繁殖器官多是块根、块茎、鳞茎、枝条等，体积大、含水量高，包装、运输十分不便，特别是远距离调运损失很大，而离体繁殖十分方便，以马铃薯为例，按一亩地4000个则只有1Kg左右（100－200mg/每个）。 三、植物快速繁殖基本方式 1、外殖体繁殖 2 腋芽增殖 培养方法简单，能高度保持遗传稳定性，能长期继代繁殖，这种繁殖方式一般不需要添加外源激素。 3、不定芽增殖 从现存的芽以外的任何器官、组织上通过器官发生重新形成的芽称之为不定芽。 特点：繁殖系数高；遗传稳定性较好。但继代次数有限。 4、体细胞胚增殖 增长率高，双极性免去生根环节，但胚状体休眠的诱导和解除难免把握，其成苗率不高。目前除一些特殊用途（人工种子），这一途径还没有用于快速繁殖。 5、愈伤组织增殖 所有植物通过组织培养的方法均可以诱导愈伤组织，再进一步分化即可获得小植株。 特点：成功率高，繁殖系数大，但遗传稳定性差，对品种要求遗传稳定性高的作物一般不采用这一途径快繁。 植物离体快速繁殖技术的程序 植物离体快速繁殖技术程序示意图 植物离体快速繁殖技术的关键 1. 防止污染，保证快速繁殖的质量和速度 2. 植物材料预处理 3. 芽的增殖 4. 变异的来源和控制 5. 根的诱导 6. 再生植株的锻炼与移栽 7. 再生植株的鉴定 ① 细胞学鉴定 ② 形态学鉴定 第二节 植物脱毒 植物脱毒基本原理 病毒在植物体内的分布具有不均匀性 1934年，white 通过观察烟草根系，首先发现病毒在根系的不同区域分布是不均匀的，越是靠根尖病毒含量越低，在根尖分生组织区（生长点）的顶端不含病毒。 1949年，Limasset and Cornuet 根据White的发现提出，在芽的分生组织区也应该存在与根尖分生组织同样情况。 1952年，Morel and Martin 首先利用茎尖分生组织培养获得了马铃薯无病毒苗，同时建立了茎尖脱毒的组织培养技术体系。 植物脱毒的基本程序 1、母体植株的选择与预处理 健康的母株作为外植体 香石竹在38－40℃条件下经两个月处理可以除去全部病毒。 菊花在35－38 ℃条件下经60天处理可以使病毒失活。 马铃薯在37 ℃条件下处理10－20天能除去卷叶病毒。 柑橘－速衰病毒/黄化病毒40/30 ℃条件下处理7－12周。 磷皮病毒需要在40/30 ℃条件下处理8周。 啐叶病毒需要在50 ℃条件下处理3－22小时。 青果病毒在50 ℃条件下处理30－40分钟。 外殖体热处理 2、茎尖分生组织培养再生植株 基本过程： 外植体消毒－茎尖剥离－茎尖培养 3、脱毒效果检测 指示植物鉴定（test plants）所谓指示植物是指具有能够辨别某种病毒的专化性症状的寄主植物。 血清鉴定（serologic test）试管沉淀反应；免疫双扩散；酶联免疫吸附测定（ELISA）。 4 影响脱毒效果的因素 母体材料病毒浸染的程度 外植体的生理状态 起始培养的茎尖大小 5 脱毒苗的保存与繁殖 脱毒苗的离体保存与繁殖 建立脱毒苗生产繁殖网络体系 木本植物建立隔离的脱毒苗母本园 本章要点: 掌握植物离体快速繁殖的概念及其技术程序与关键，掌握植物离体快速繁殖中的器官发生方式，了解植物离体快速繁殖的用途和优越性以及植物脱毒的原理与植物脱毒的程序。 谢谢！