SDF1α促黏附作用与上调CXCR4的表达相关.doc

原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包 含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共 同工作的朋友对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。  作者签名：  日期：  年  月  日  关于学位论文使用授权说明 本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论 文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文； 学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。  作者签名：  导师签名：  日期：  年  月  日  2 SDF-1α 促黏附作用与上调 CXCR-4 的表达相关  （摘  要） 研 究 生：邹正生 指导教师：涂玉林 教授 王 佐 副教授 专 业：病理学与病理生理学 中 文 摘 要 趋化因子 SDF-1α 及其受体 CXCR4 在胚胎发育、肿瘤细胞转移及介导免疫 缺陷病毒(HIV) 感染等方面起着重要作用。最近研究表明 SDF-1α 在动脉粥样硬 化斑块中高表达,SDF-1α/CXCR4 与动脉粥样硬化的关系已经引起重视。 本研究首先探讨 ox-LDL 对内皮细胞上 SDF-1α 表达的影响，然后用 SDF-1α 处理的 THP-1 单核细胞上对 CXCR4 的表达进行研究，最后对 SDF-1α/CXCR4 在单核细胞/血管内皮细胞黏附的作用进行研究。 目的： ox-LDL 对内皮细胞 SDF-1α 表达的影响；SDF-1α 对 THP-1 单核细胞上 CXCR4 表达的影响；SDF-1α 和 CXCR4 抗体干预对 THP-1 单核细胞与内皮细胞 黏附的影响；以便探讨 SDF-1α 促进单核细胞与内皮细胞黏附作用的机制。 方法：RT-PCR 检测 SDF-1α 和 CXCR4 mRNA 的表达，Western blot 检测其蛋白 表达变化，观察 ox-LDL 对内皮细胞上 SDF-1α 表达的剂量和时间效应，观察 SDF-1α 对 THP-1 单核细胞 CXCR4 表达的影响。用静态黏附实验来研究 THP-1 与内皮细胞的黏附，用 25μg/ml ox-LDL 或不同浓度 SDF-1α 处理内皮细胞 48h 或 30min 后，将 THP-1 单核细胞与内皮细胞共孵育后洗脱检测黏附作用，并加 用不同浓度的 CXCR4 抗体阻断。 结果：SDF-1α 在正常的血管内皮细胞上几乎不表达，ox-LDL 可以上调内皮细胞 上 SDF-1α 表达，0-125μg/ml ox-LDL 处理 48h，随 ox-LDL 浓度增加，SDF-1α 的表达亦逐渐增强，当 ox-LDL 浓度为 25μg/ml 处理 48h，SDF-1α 表达到达峰值。 用 25μg/ml ox-LDL 与内皮细胞孵育 0-48h，随着处理时间的延长，SDF-1α 表达 逐渐的增强，在 48h 时，SDF-1α 的表达达到最大。100ng/ml SDF-1α 可以上调 THP-1 单核细胞上 CXCR4 的表达。Ox-LDL 可以增强 THP-1 与内皮细胞的黏附， 25μg/ml ox-LDL 处理组 THP-1 与内皮细胞的黏附细胞数最多，但可被 CXCR4 抗体所抑制。经外源性 SDF-1α 处理的内皮细胞与 THP-1 的黏附数明显增多，同 5 样可被 CXCR4 抗体所抑制。 结论：ox-LDL 可以使内皮细胞上 SDF-1α 表达增强，SDF-1α 可以上调 THP-1 单 核细胞上 CXCR4 表达，SDF-1α 通过上调单核细胞 CXCR4 表达促进单核细胞与 内皮细胞黏附。 关键词：ox-LDL；SDF-1α；CXCR4；黏附；动脉粥样硬化 6 The Pro-adhesive Effect of SDF-1α Related to the Expression of CXCR-4 (Abstract) Chemokine SDF-1α and its receptor CXCR4 plays an important role in embryogenesis, tumor metastasis and mediation HIV infection and so on. Recent study show SDF-1α/CXCR4 is highly expressed in atherosclerosis plaque, so its role in atherosclerosis has been paid close atte