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水稻光合关键酶定位与 叶片衰老过程生理生化 硕士：王妮妍 导师：蒋德安 教授 翁晓燕 副教授 摘 要 本研究透过对水稻时片中Rubisco及其活化酶进行镭魏器定位，同时结合水稻 光合日变化规律，再利用免疫扩散定量分析法，研究这两种酶的分布、含量以及活 力在一天中的动态变化，深入探讨了光合关键酶Rubjsc。和RCA活性在中午下降的 原因；同时，通过对剑叶衰老期间光合及光合关键酶动态的观察以及对lO叶期水稻 全栋不同时位叶片和整个衰老期间单个叶片(第il叶稚剑对)衰老楣关生理生化变 化关系的研究，为光合“午休”理论的深入、Rubisco活化酶生理功能的进一步明确 以及延缓光合下降，提高水稻光合生产率等方面提供了理论依据。也为进一步利用 分子生物学手段研究衰老调控做些基础性工作。 分布于叶绿体和线粒体中：Rubisco初始活力和配A活力与光合日变化密切相关 在光照最强的13时，出现光合“午休”，叶绿体中Rubisco的密度有一定程度降低 力变化与叶绿体中RcA含量变化较为一致，表明Rc^在叶绿体中的分布对调节其本 身活力和Rublsco活性有重要作用。 水稻剑叶抽穗后，其光合速率持续下降，但下降有缓降和速降期，缓降期(抽 III 穗后15天内)内剑叶的光合速率变化不大，抽穗后7天达最大值：速降发生在第14-21 降有关。 不同叶位的叶片，其叶绿素含量、Hill活力、可溶性蛋白含量和soD活力都呈 现从上到下先升后降的变化，但不溶性蛋白含量变化很小，MDA含量则是持续上升 ll叶和剑叶从出叶到近死亡过程中。叶片叶绿素含量、HiH活力、可溶性蛋白含量 以及s0D活力也都是先升后降，MDA含量持续上升，不溶性蛋白含量的变化幅度相对 较小。 对全株从上到下的叶片与第11叶出叶后5天、剑叶出叶后5天各项生理生化指 标每隔5天的值对应进行回归分析，结果表明，Hill活力、可溶性蛋白含量、MDA 含量和SoD活力，均有显著正相关。Hill活力变化上，不同叶位叶片的变化与第11 叶和剑叶的变化相关系数分别为0．78和0．8695；可溶性蛋白含量变化上，相关系数 活力变化上，不同叶位叶片与第11叶的变化相关系数为O．6603，与剑叶没有相关性 而在叶绿素含量和不溶性蛋白含量变化上都没有相关性或相关系数很小(R2o’3)。 这表明除叶绿素和不溶性蛋白含量外，全株从上到下每个叶位叶片的生理生化指标 相当于11叶或剑叶从展开起到死亡每隔5天的生理生化指标。 关键词：光合关键酶：Rubisco；Rubisco活化酶；日变化：衰老 致 谢 本研究在导师蒋德安教授、翁晓燕副教授的悉心指导下完成。它凝聚了 两位导师辛勤的汗水耳a耐』乜细致的教导。导师渊博的知识、敏锐的洞察力、 严谨的科研治学态度、求实的学术作风、以及平易近人的高尚人格给我留下 了深杰q印象．将使鼗终身受益。值此毕业之际．谨向恩师致以衷心的感谢和 崇高的敬意。 感谢电镜室洪健、徐颖、方月鲜老师以及生物技术研究所胡东维副教授 在肢体金标记实验部分给予的指导和帮助。蒋琴素老师在实验过程中提供了 许多便利条件。感谢本实验室张峰、孙骏威、金松恒、黄宗安．刘信，植物分 子生理实验室鬟p炳松以及生物技术研究所赵淑芳等同学在实验过程中的热1青 帮助：生命科学院00级学生陈烨、曾勇、于洁、张宏梁、陈大明、杨君等在 实验中也给予了大力协助。 感谢我的父母对我告9养育和全力的支{争与。关怀：感谢我的妹妹给我的关 心和鼓励：感谢我的表姐、表姐夫给我物质上和精神上的支持。 感谢所有关心、支持和帮助我的老师、同掌和朋友们 本研究是蒋德安教授主持课题的国家自然科掌基金的资助(No 一部分．在此一并表示感谢。 王妮妍 二零零三年五月