IRF-7对草鱼(Ctenopharyngodon+idella)Ⅰ型干扰素转录的调控.pdf

摘要 摘要 干扰素(IFN)是一种具有抗病毒，抗肿瘤以及调节自身免疫等多种功能的糖 蛋白。干扰素调节因子(IRF)因对干扰素具有转录调控功能而得名。干扰素调节 因子1、5、7在调控干扰素以及干扰素刺激基因(IsGs)转录方面扮演着重要作用。 在哺乳类动物中有关IRF调控机理的研究已有很多，但在鱼类中有关他们研究还 比较少。草鱼是我国重要的经济鱼种，本文主要研究了草鱼IRF．7对I型干扰素 的调控机制。 在实验室已克隆1个草鱼I型干扰素基因组及其启动子序列的基础上，我们 对其序列特征进行了分析，发现草鱼I型干扰素基因启动子包含启动子也包含一 个典型的TATA 结合位点。根据其启动子的结构特征，我们克隆了含有不同结合位点的CilFN启 I：C诱导之后表达水平上调。 鱼肝，脾，肾中的表达水平，发现CilRF-7经poly 并且通过原核表达系统获得草鱼IRF．7DBD结构域蛋白。通过凝胶阻滞分析得出 草鱼服F7能够在体外与删各个启动子片段结合，为证明它们对IFN的调控 作用提供了可靠的证据。我们还利用共转染实验技术，将CilRF-7和IFN启动子 片段分别转染至小鼠骨髓瘤细胞和草鱼肾细胞，结果表明CilRF-7能够诱导上调 CilFN启动子，揭示了草鱼IRF-7对I型干扰素的正调控作用。 I：C诱导上调。我们还原核表 鱼各组织内具有微量的组成性表达，也能够被poly 蛋白能够与不同CilFN启动子片段结合。 关键词：干扰素调节因子7；I型干扰素；启动子；转录；草鱼 Abstract Abstract a of Interferon(IFNs)aremulti-functionalthat family diverse glycoprotein play rolein andSOon．Interferon anti—vires，anti-tumor,immune regulation regulatory their nametotheir as factors(IRFs)owe discovery factorsfor I transcriptiontype andIRF-7are interferons(IFNs)。IRF-l，IRF-5 mediatorswhich transcription would an rolein the ofIFNand playimportantinducingexpression IFN—stimulated genes studieshaveidentified mechanismofIRFsin (ISGs)．Many regulation mammals．but there arelittleinfish．Grass