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转化茴香脑生成茴香酸菌株的筛选鉴定和发酵条件的优化 摘要 茴香酸是常见的食品香料，又是用于制造多种香料的前体物质。医 学上也用于血液检验和合成重要的制药中间体。当前工业生产茴香酸的 方法主要有化学氧化法和化学合成法，都存在高耗能和易污染的缺点， 且合成茴香酸的价格远低于天然茴香酸。因此，以生物技术方法制取茴 香酸具有重要的意义。 本研究从广西八角产区的土壤样品里经过富集、分离纯化得到286 株菌株，再经过耐受高浓度茴香脑的初筛、高积累茴香酸的复筛，采用 气相色谱法检测发酵液，得到茴香酸的摩尔生成率为1O．25％的菌株 WGB31。经过形态学鉴定、生理生化特性鉴定和16SrDNA分子生物学 1鉴定为伯克霍尔德菌 鉴定和系统进化分析，将目的菌株WGB3 (Burkholderiasp．)。 通过对影响菌株WGB31转化茴香脑生成茴香酸的发酵单因素研 究，确定各因素的取值范围之后，选取葡萄糖浓度、初始pH值和装液量 这三个显著影响因子采用Box—Behnken 响应面回归分析和显著性分析，得到关于茴香酸产量的二项式方程和模型。 模型稳定点的发酵条件为：葡萄糖浓度6g／L，蛋白胨浓度6pJL，初始pH 为6．2；250mL三角瓶中装液量61 mL，接种浓度8％，底物浓度4∥L，培 h。验证实验表明茴香脑降 养温度28℃，摇床转速180r／rain，转化时间24 解率为78．75％，为优化前的1．5倍；茴香酸的生成率为30．7％，为优化前 的3倍，优化效果明显。本研究结果为生物转化法生产茴香酸提供了依据 和参考。 关键词：生物转化茴香酸气相色谱法 响应面分析发酵条件 II Isolation and characterizationofstrains aboutbioconversionof anethole anisic acidand offermentation generate optimization conditions ABSTRACT Anisic common a substanceusedinthe acid，a flavoring，isprecursor manufacturea of of andan varietyspices important beusedforbloodtestsinmedicine．Therearetwo intermediates，can primary methods anisicacidincurrentindustrial chemical producing productionby oxidationandchemical exists of synthesis，whichdisadvantageshighenergy andeaseof ofthemanmadeanisic