SLE患者T细胞增殖中AktGSK3β信号通路异常及其在骨髓间充质干细胞干预中变化.pdf

及其在骨髓间充质干细胞干预中的变化 专业名称： 皮肤病与性病学 学位oo请人： 汤红峰 导师： 曾凡钦教授 中文摘要 研究背景 SLE是一种典型的自身免疫性疾病，存在多种免疫异常，包括T、B淋巴细 胞的异常活化增殖，自身反应性抗体的大量产生，免疫复合物的形成及沉积，造 成组织器官，特别是肾实质的免疫损伤，引起肾小球肾炎，甚至肾功能衰竭。 学者们普遍认为人和小鼠狼疮发病过程中T细胞异常活化增殖起关键作用， 抑制T细胞的活化和增殖对SLE治疗有重要意义。Akt／GSK3[3途径是影响细胞 增殖活化的一条重要通路，Akt在T淋巴细胞活化增殖过程中作为增殖及生存信 号的重要介质，其磷酸化可调控细胞周期进程促进T细胞增殖。越来越多的证据 显示Akt的异常磷酸化可通过促进细胞增殖参与疾病的发生发展，研究表明SLE 小鼠T细胞中Akt的磷酸化水平增高。磷酸化的Akt主要通过对含有丝氨酸／苏 氨酸残基的底物磷酸化而发挥作用，目前，已确认的Akt下游底物包括asK313、 刺激时GSK3B可使p27bpl磷酸化，增强其稳定性，阻止细胞周期进程。与Akt 相反，静息细胞中GSI(313处于活化状态，细胞活化时其磷酸化而失活，文献报 化和IL．2产生调节TCR介导的T细胞增殖。尽管既往研究证实调节Akt上游分 发病有影响，但关于人类SLE患者Akt在T细胞增殖中的表达，特别是Akt的 表达与狼疮肾炎的关系国内外相关报道较少，且其对下游蛋白分子GSK313的影 响仍不清楚，需要进一步证实这一途径在人类SLE发生发展中的作用。 目前由于发病机制未明，SLE尚缺乏理想的治疗方法，寻求相对创伤小、简 便、安全、易于临床应用的治疗方法已成为目前国内外研究的热点。 Marrow Stem 骨髓间充质干细胞(Bone Cells，BM．MSC)是骨 Mesenchymal 髓中除了造血干细胞以外的另一类干细胞，具有诱导免疫耐受和免疫抑制、促进 免疫重建的作用。通常抗原刺激可引起T细胞分裂，BM．MSC可通过抑制细胞 分裂而使细胞积聚在Gl期。体外研究发现MSC能抑制包括同种异体抗原和丝裂 原引起的T细胞增殖。 目前关于BM．MSC抑制T细胞增殖作用的详细机制尚不清楚，文献报道可 能与以下因素有关：1．通过分泌可溶性细胞因子IL．10、IL．2、TGF[31和前列腺 素(PG)E2等介导；2．通过CD8+调节性T细胞发挥抑制作用；3．通过吲哚胺2，3 二氧化酶(IDO)催化色氨酸转化参与MSC对T细胞的抑制效应；4．MSC可通过 诱导调节性APC(抗原提呈细胞)的产生而抑制T细胞活化。然而，关于BM．MSC 是否通过影响Akt／GSK313信号通路抑制SLE患者T细胞增殖国内外尚未见报道， 了解SLE患者T细胞增殖中Akt／GSK313信号通路在骨髓间充质干细胞干预中的 变化，可进一步揭示BM．MSC抑制患者T细胞增殖的作用机制，为BM．MSC 治疗SLE提供新的理论依据。 本实验首先观察了SLE患者T细胞增殖中Akt／GSK313通路的活化状态，并 在此基础上探讨SLE患者T细胞增殖时Akt／GSK31B信号通路在骨髓间充质干细 胞干预中的变化。 壁垒兰羔：! 苎!：星宴查I缉堕擅堕主△塾堑s坠色篮星道整数基鲎丛基至旦丛：M墨￡王亟主盟奎丝 主塞垫噩 通路的异常表达 目的：通过观察SLE患者特别是狼疮肾炎患者T细胞增殖过程中Akt／GSK313 信号通路的表达情况，了解Akt／GSK31]信号通路在SLE患者T细胞异常增殖过 程中所起的作用。 方法： 1、研究对象 实验中SLE患者均符合1997年修订的美国风湿学会SLE诊断标准，疾病活动 Disease 评分标准采用SLEDAI(SLEActivityIndex)。根据是否有肾损害分为肾损 害组(RSLE组)和非肾损害组(SLE组)。选择性别、年龄与患者组相匹配的健 康志愿者作为对照。 2、外周血单个核