苦瓜叶片提取液对菜粉蝶各虫期生长、发育及蛋白质组分影响.pdf

中文摘要： 本文利用乙醚，丙酮，清水三种溶剂浸提苦瓜叶片，并分别采用lO％、30 ％、50％三个不同浓度的提取液涂抹甘蓝叶片饲喂菜粉蝶幼虫——菜青虫。比较 观察不同溶剂、不同浓度苦瓜叶片提取液(以下简称提取液)对菜青虫生长、发 育的影响，找出了最佳的提取液浓度，同时对菜粉蝶及蛹态进行蛋白质双向电泳 分析。 实验结果表明菜青虫取食了涂抹提取液的甘蓝叶片后，其取食量明显降低， 行为迟钝、形态卷曲，甚至死亡。以清水对照为准，不同溶剂提取液对幼虫取食 量、体重的影响，以乙醚提取液影响最大．作用最强，其次是丙酮和清水；从卷 曲率和死亡率来看：仍是乙醚提取液比丙酮、清水的高；当试虫进入蛹期时，卷 曲率和死亡率明显提高；提取液对化蛹率和羽化率的影响均是乙醚提取液比丙酮 和清水的低。无论哪一种溶剂提取液均对试虫生长发育产生强烈的抑制和毒害作 用。三种溶剂比较，以乙醚提取液处理的作用最强。 试验表明10％、30％、50％三种浓度提取液对菜粉蝶各虫态的影响是：每 种浓度提取液都对试虫生长、发育产生强烈的抑甫4和毒害作用。三种浓度比较， 以50％的浓度作用效果最强，而10％和30％的浓度作用效果无明显差异。采用 10％的提取液浓度有利于进一步研究提取液对试虫下一代的长效影响和满足本 研究的连续性，同时也达到经济有效的目的。因此选取10％的浓度为最佳提取 液浓度。 运用双向电泳技术对试虫蛹态进行了蛋白质变化分析：与清水对照相比，经 过乙醚苦瓜叶片10％浓度提取液处理的试虫，在化蛹初期诱导产生出四个蛋白 7．5， 6．0五个蛋白质组分。在致死蛹中诱导 6．9，97kD／pI7．3，21kD／pI21kD／pI 6．7四个 6．1，21kD／p16．5，21kD／pl 产生分子量和等电点为21kD／p15．9，21kD／pI 蛋白质组分。以上这些蛋白质组分的增加和缺失可能参与了试虫体内一些生化代 谢变化的调控，与提取液作用有一定的相关性。 运用双向电泳技术对畸形菜粉蝶进行了蛋白质变化分析，结果表明：在蛋白 质图谱中：畸形蝶蛋白质图谱与对照蛋白质谱型相类似，两图谱之间较平行，均 范围，其中约有50个左右蛋白质含量较丰富。与对照相比，在畸形蝶图谱中缺 失了两个蛋白斑点，分别为：64 kD／p15．5，31kD／p16．0。诱导产生出15个新的蛋 白斑点，分子量和等电点为：43 kD／p17．0，38 29kD／p15．2，25kD／p15．1．25kD／pI 作为植物源生物农药具有持效性长，作用持久的特点，畸形蝶中蛋白质组分的增 加和缺失与蛹态中一样可能参与了试虫体内一些生化代谢变化的调控，与提取液 作用有一定的相关性。 运用电感耦合等离子体发射光谱仪对不同溶剂苦瓜叶片提取液常量及微量 元素进行了分析：与对照组比较，处理组元素含量有一定变化，元素Na、K、 清水丙酮乙醚；元素cu、zn的含量是乙醚丙酮清水。 运用双向电泳技术对不同溶剂苦瓜叶片提取液的蛋白质进行分析，发现了不 同的提取液中出现了一些特异的蛋白质组分。在乙醚苦瓜叶片提取液中检测到的 检测到4个着色较深的蛋白质斑点，而缺失了2个蛋白质斑点。丙酮提取液蛋白 些蛋白质组分的出现或缺失将为进一步研究苦瓜叶片抗虫机理奠定基础、为抗虫 物质的分离、提取提供依据。 关键词：苦瓜叶片提取液菜粉蝶生长发育蛋白质 V ofthe Theinfluence M．C’harantialeavesextractson and ofeach growth，developmentprotein components ofPieris periods developing