雷帕霉素对阿霉素肾病大鼠肾小球滤过膜影响.pdfVIP

中文摘要 雷帕霉素对阿霉素肾病大鼠肾小球滤过膜的影响 摘 要 微小病变肾病一直是国内外研究的热点，阿霉素 (adriamycin、ADR)肾病是公认的类似人类微小病变。肾病的 动物模型。国内外学者对微小病变。肾病发病机理作了大量 研究，认为可能是遗传、病毒感染介导的细胞因子异常、 过氧化损伤、细胞免疫的改变等因素，导致了肾小球滤过 膜病变，引起大量蛋白尿为主的一系列临床表现。其中肾 小球滤过膜改变是最关键的环节。本病的治疗以激素及免 疫抑制剂为主，辅以抗氧化剂、降脂药物、ACEI类药物 及中药等。新型免疫抑制剂效果强，副作用小，已倍受重 是研发的热点。目前研究认为环胞素对肾病综合征治疗有 效率可达75％～90％，但是环胞素治疗过程中可出现肾毒 性，即局灶性小管间质损害；雷帕霉素是一种高效低毒的 免疫抑制剂，通过与FKBPl2(FK506结合蛋白)结合，发挥 其免疫抑制作用，目前尚无雷帕霉素作用予肾病大鼠的报 道。日本学者川口吾曾报：道过FK506可降低肾病大鼠的蛋 白尿，减轻肾小球足突融合及基底膜负电荷位点丢失的程 度。而雷帕霉素和FK506作用受体相同，结构相似，可能 会对肾病大鼠产生相似的影响。 目的：本研究通过建立大鼠肾病综合征模型，进行不 同药物、不同组别的对照研究，观察不同剂量的雷帕霉素 对肾病大鼠的血、尿生化指标，及肾小球基底膜负电荷位 中文摘要 点的影响，并与环胞素作对照，为雷帕霉素应用于人类肾 病综合征的治疗提供一定的实验依据。 方法：实验动物为健康雄性SD大鼠，体重2209左右 (河北医科大学动物中心)。实验用药是盐酸阿霉素(汕头 明治医药公司)、雷帕霉素(华北制药集团)、环胞素(华 北制药集团)。 复制肾病综合征动物模型：取健康雄性SD大鼠，在 非麻醉状态下，按5mg／kg从大鼠的尾静脉一次性注射盐 酸阿霉素，健康对照组尾静脉注射等量的生理盐水。 分组和给药：实验分5组，每组8只大鼠。分别为： 健康对照组即A组，病理模型对照组即B组，环胞素组即 C组，雷帕霉素1组即D组，雷帕霉素2组即E组。其中 B、C、D、E组均按上述方法复制成肾病综合征模型，C、 D、E组按以下的药物剂量每日一次灌胃给药：C组环胞素 ·d，灌胃给药共14天，整个实验56天。 观察指标：分别于第0、7、14、56天测定各组大鼠的 24小时尿蛋白定量、血清白蛋白、总胆固醇、尿素氮、肌 酐；实验第14天，A、B两组各随机取三只大鼠的肾组织 行光镜、透射电镜观察：实验第56天，A、B、C、D、E 五组每一组随机取三只大鼠的肾组织行光镜、透射电镜和 组化电镜观察，其中组化电镜以聚乙烯亚胺(PEI)为阳离 子探针标记。肾小球基底膜负电荷位点，并用每1000rim长 度的基底膜(靠近足突侧)负电荷位点的个数来表示。 结果：肾病综合征动物模型的复制：血、尿生化指标 (见表1)。大鼠自注射阿霉索第14天，就开始出现大量 中文摘要 和高胆固醇血症。肾脏组织学改变：A组：光镜下，肾小 球无异常；电镜下亦无异常。B组：注射阿霉素14天后， 电镜下即可见足突的融合。依据血、尿生化指标的改变和 电镜的结果，表明肾病综合征大鼠模型已复制成功。 雷帕霉素对肾病大鼠的血、尿生化指标的影响：实验 第56天，B、C、D、E四组的24小时尿蛋白定：量、血清 胆固醇均高于A组，而血清白蛋白均低于A组，各组与A 组比较有显著性差异(P()．05)；C、D、E三组24小时尿 蛋白定量、血清胆固醇均低于B组，血清白蛋白均高于B 组，与B组比较有显著性差异，提示雷帕霉素和：吓胞素可 减少肾病大鼠尿蛋白；D、E两组24小时尿蛋白定量低于 c组，血清白蛋白高于C组，与C组比较有显著性差异， 提示雷帕霉素对降低肾病大鼠尿蛋白有效，且效果优于环 胞素。 雷帕霉素对肾病大鼠的肾组织学的影响：A组：光镜 及普通电镜均正常，组化电镜：基底膜负电荷位点分布均 匀。B组：肾脏肉眼观呈“大白肾”状，光镜下无明显异 常，电镜下肾小球基底膜无明显增厚，上皮细胞明显空泡 变性，可见微绒毛形成，系膜区可见较多的电子致密沉积 物，足突广泛融合。组化电镜可见基底膜负电荷位点明显 减少。C组：光镜下肾小球未见明显异常，电镜下可见足 突部分