染料木黄酮对去势小鼠脾细胞凋亡及雌激素受体亚型表达影响.pdfVIP

染料木黄酮对去势小鼠脾细胞凋亡及雌激素受体亚型表达的影响 中文摘要 背景：随着植物雌激素在围绝经期妇女中的广泛应用，有关它的研究也越来越多。 关于植物雌激素，尤其是染料木黄酮(genistein，GEN)的免疫调节作用已引人注 目。但关于染料木黄酮对免疫细胞凋亡及免疫细胞上雌激素受体亚型影响的研究 仍很少。 亡及相关调控基因Fas、FasL的影响，同时比较GEN和雌二醇对雌激素受体亚 型表达的影响，为染料木黄酮的临床应用提供理论和实验依据。 材料与方法 本实验取10周龄BALB／C小鼠(由复旦大学实验动物部提供)，分为3组： 组于术后5天起行阴道脱落细胞涂片，连续5天均未出现角化细胞为手术成功。 假手术小鼠即将10周龄BALB／C小鼠双侧腹下区进腹取少量脂肪组织后关腹。 OVX小鼠及假手术小鼠在术后第11天与青年组同时无菌取脾，研磨，制备脾细 胞悬液，假手术组及青年对照组脾细胞悬液放入未加药的培养液中，OVX小鼠 脾细胞悬液放入含有不同药物的培养液中。根据培养液中所含药物及药物浓度的 umol／l、lOn一4umol／l、lOn．3umol／、10n一2 不同将OVX小鼠分为：去势+E2(10“一5 umol／四个浓度)、去势+GEN(3．7umol／1、18．5umol／1、37．0umol／l、92．5umol／1 四个浓度组)、去势+溶剂(DMSO)组、去势空白对照组，共计12组。然后将 PI双重染色后流式细胞仪测定脾细胞凋亡率；另一部分细胞悬液待提取脾细胞 表达。 结果 1、 脾细胞凋亡率：去势空白对照组与去势+DMSO组、青年组与假手术组捌 亡率无统计学差异；去势空白对照组和去势+DMSO组的凋亡率均高于苛 4 凋亡率都高于青年组对照组(p0．05)，而与去势对照组相比，最高的两个 高(p0．01)。 2、 年组与假手术组其Fas、FasL基因的表达无统计学差异；去势空白对照组 组Fas、FasL基因的表达都高于青年组(pO．05)，而与去势对照组相比， umol／1、92．5 基因的表达高于青年组(pO．05)，在37．0 umol／1时FasL基 因的表达高于青年组(p0．05)，而与去势对照组相比，最高浓度(92．5umol／1) 时Fas、FasL基因的表达增高(Fas：pO．05；FasL：pO．05)。 3、 手术组其ERa、ER岱基因的表达无统计学差异；青年组和假手术组ERa、 ER 13：p0．01)；去势+E2组ERa、ER 8基因的转录水平在10n一4umol／1时 B基因的转录水平随浓度增加有增加趋势，在最高浓度时(92．5umol／1)高 于去势对照组(ERa：p0．05：ER口：p0．OI)。 结论 与青年对照相比，去势小鼠脾细胞凋亡率增加， Fas、FasL基因表达增加， ERa、ER B基因表达降低。脾细胞凋亡的增加可能与Fas、FasL基因表达的增多 有关。 与雌二醇相似，染料木黄酮在高浓度时，增加去势小鼠脾细胞的凋亡率，同 时Fas、FasL基因的转录水平也升高。提示染料木黄酮、雌二醇致脾细胞凋亡 可能与上调凋亡促进基因Fas、FasL基因表达有关。 低剂量的雌二醇脾细胞凋亡率及Fas、FasL基因与青年组无差异，低浓度染 料木黄酮脾细胞凋亡率及Fas、FasL基因与青年组无差异，染料木黄酮和雌二醇 均可能逆转去势小鼠脾细胞凋亡。 不同浓度雌二醇对脾细胞上ERct、ERB基因表达的影响体现了雌二醇对ER 的双相调节作用：在生理范围内为正向调节作用，超生理范围为负向调节作用。 高浓度染料木黄酮增加ERa、ER 13基因表达。染料木黄酮对脾细胞凋亡及ERs 的表达可能不完全通过ER途径调节。 实验结果提示临床上使用雌二醇或染料木黄酮时应该采用最小的有效剂量。 关键词 染料木黄酮 17．B雌二醇 脾细胞