棉秆蛋白提取及分离纯化.pdf

摘要 本文采用不同的提取方法提取棉秆蛋白，对影响棉秆蛋白提取率的因素进行了研 究，并对棉秆蛋白进行了分离纯化，采用凝胶过滤柱层析和SDS．PAGE对棉秆蛋白分子 量的组成情况进行了初步了分析。 棉秆粗蛋白的提取实验主要考虑的影响因素有：pH值、提取剂种类、提取剂浓度、 提取温度、提取时间、提取剂体积等。实验中采用的提取方法有Na0H提取法、NaCI提 取法、H。0提取法、超声波法、纤维素酶法、表面活性剂法、AUC提取法、乙酸提取法。 其中对NaOH提取法、NaCl提取法、}120提取法进行了正交试验，研究备方法对棉秆蛋白 提取率的影响。结果表明，以NaoH为提取剂时，Na0H浓度为0．3％，提取温度50℃， 提取2次，棉秆蛋白提取率达到52．03％；以H20为提取剂时，提取温度60℃，提取时 脱色时间45min，脱色温度45℃，蛋白得率为94．4l％，脱色后蛋白呈乳黄色。棉秆蛋 白的凝胶过滤柱层析结果表明，上述三种方法提取的棉秆蛋白中不同分子量的蛋白所占 一组蛋白亚基所占比例最大，90，000Da以上次之，20，000Da以下最少。 关键词：棉秆蛋白提取分离纯化 ABSTRACT Inthe methodsfor cottonstalk andthefactors presentpaper，differentextracting protein extractionwere and ofCOttOnstalk affectingprotein investigated．Isolation purification were alsodiscussed．Themoleculardistributionof protein cottonstalk was weight protein tested andSDS—PAGEmethods． bygelpermeationchromatography The factors theextractionofcottonstalk werethe kindof affecting protein value，the pH concentrateof protein solution，the extracting protein extracting timeandthevolumeof solutionsfor temperature，extracting extractingsolution，etc．Many cottonstalk in weretestedthis proteinextracting studyincluding acid．othermethodsas AUC，acetic such treatmentalSO supersonictreatment，eellulosew