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番茄限基因的转化和表达及相关的胁迫乙烯反应 中文摘要 逆境诱导乙烯的产生，乙烯又是高等植物胁迫反应的调节者。NR基因是乙烯受体蛋 白基因，与植物的抗性也有密切的关系。本研究建立了番茄高效遗传转化体系；获得了 用于乙烯逆境信号转导研究的NR突变体和抗性强的转基因番茄育种材料。通过各胁迫 因子与乙烯关系的研究和一系列生理指标的测定，通过NR基因mRNA含量的变化和 NR突变体在逆境下的表现，探讨了逆境在乙烯信号转导途径中的作用。庄要结果如下： l、丽春番茄分别在激素浓度为6一BA 和6一BA 0．5mg几+I从0．1mg／L的培养基上生芽、长茎和生根，能获得高的转化率。 2、始终采用50mg几卡那霉素的选择压，直接用农杆菌原液侵染外植体，和马铃薯 浸提液、lmg／LI从处理农杆菌菌液，可使平均转化率达9—11％。 3、NR突变体节间长、分枝少，抗性强，果实成熟期延长。 4、乙烯使番茄幼苗叶片黄化、衰老和脱落、使番茄幼苗表现乙烯三重反应，这是 因为乙烯诱导了NR基因的表达，从而使番茄叶片细胞膜透性增大，蒸腾作用、呼吸作 用增强和增大气孔导度；但对番茄NR突变体植株影响相对较小． 5、Li+诱导乙烯和NR基因的表达；并与乙烯协同作用．促使幼苗表现三重反应， 增加细胞膜透性和短期内使植株蒸腾作用、气孔导度、呼吸作用增加：最后导致植株严 重受害。因此，Li+参与了乙烯的代谢，促进产生乙烯综合症． 6、低浓度的水杨酸使番茄黄化苗下胚轴伸长，呼吸作用降低；但有乙烯时、水杨酸 抑制幼苗的生长，并在短期内使其各项生理指标和NR基因的mRN^含量增高，植株叶 片黄化。NR突变体对水杨酸不敏感，水杨酸处理时、植株无外部受害症状，NR基因表 达少。因此，抑制NR基因的表达，可减少水杨酸对植株的危害，增强植株的抗性。 7、高浓度的IAA处理，使番茄黄化苗下胚轴迅速伸长，各项生理指标都保持较低 水平，表现出与乙烯相反的代谢。但IAA和乙烯的处理、使NR基因大量表达，番茄各 生理指标迅速增高，表现出乙烯综合症。 8、ABA处理植株后，在短期内、植株细胞膜透性变化不大，呼吸作用降低．随后． ABA导致气孔关闭，NR基因大量表达、叶片蒸腾、呼吸作用降低，细胞间二氧化碳浓度 增大。最终使植株生长受阻，番茄实生苗黄化。ABA与乙烯的作用加重乙烯综合症。 9、干旱诱导了NR基因的大量表达和产生乙烯综合症及干旱胁迫症状． 10、低温抑制NR基因的表达，延迟了受害症状的出现．植株叶片出现低温受害症状 时伴随着叶片膜透性、蒸腾作用、呼吸作用、气孔导度的增加。乙烯+低温处理使细胞 膜透性等上述指标增大得更多。 总之了趋境诱导乙烯的形成，乙烯又诱导NR的受体蛋白基因表达t最终导致信号 的转导和症状的出现。在胁迫中，NR基因表达量低，植株抗逆性强；NR基因表达量高， 植株表现乙烯综合症和其它受害症状；但NR基因的过量表达有利于植物降低对乙烯的 敏感性，起负调节作用。 关键词：乙烯 胁迫 NR基因信号转导 一 ． ±里壅些查兰竖主兰竺堡壅 Abstract when is toa o疗enexhjbit of plantsubject to Vari时of stresses，th。y exposure symploms betw它enstress is ethylene．ThiscompIexreIationshjp herc and脚lene—likesymptoms cc玎ncdthe s灯雠set