牛羊毛甾醇14α-脱甲基酶(CYP51)cDNA克隆、基因结构和表达分析.pdfVIP

牛羊毛甾醇14α-脱甲基酶(CYP51)cDNA克隆、基因结构和表达分析.pdf

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摘要 MAS是担体l醇合成途彳卒中羊毛甾晰之j亓酱遍存在的中间产物。往FSH诱导的卵母细胞成熟 管MAS最早从牛睾丸中提取出来,但是关丁牛的CYP51基冈表返的研究仍不清楚。本文确定了 牛CYP51的cDNA序列以及基冈表达特点。牛CYP51 cDNA包含1509bp的开放阅读框,利1119bp elements,CRE),甾醇调协元竹 守的调协元fl·,如GC.box,cAMP反应冗什(cAMP.responsive (stero[regulatory K片段PCR和Southernblot实验没有发现CYP51假基冈。Northernblot分析结果显示,在牛全 部组织上都有一个约2.7kb的长片段CYP51mRNA表达,仅仅在成年牛睾丸上发现一个约1.8kb 的短转录本,该转录本利川了上游的多聚腿茁酸位点加尾。免接纽化实验中,使Hj兔抗人.CYP51 抗体,发现在牛睾丸中,问质细胞CYP5l蚩白表达最强。在牛卵巢中,CYP51蛋白首先m现仵 卵母细胞上,在原始卵泡和初级卵泡Jj染色较深,随卵泡增人颜色变浅。各级卵泡的颗粒细胞上 CYP5l蛋白节现背景水平的染色,但是九格拉丈卵泡上,朝向卵泡腔的粒层细胞年¨卵R细胞上 CYP5I生向的染色根深。CYP5l蚩n介黄体上的表达掣最强。上述实验说明,牛卵巢卵泡发育 过料中,CYP51蛋白的表达具有阶段性和细胞特异性。 关键词:MAS,牛,CYP51,Northernblot,CYP51蛋白 Abstract It is thatMeiosis C29 after the lanostero[,is reported activatingsterol(MAS),anubiquitousproduct an in intermediateofcholesterol substancetostimulatematuration biosynthesis,is OOCytes important FSH-inducedtransduction lanosterolto signal pathway.Lanosterol MASis isolatedfrontbovinetestis,theinformationaboutbovineCYP5l MAS.Althoughfirstly islittle.The wasconductedtocharacterizethebovineCYP51andits expression presentstudy gene isrevealedthattheeDNA bovineCYP51containsa1 flame expression.It coding 509bpopenreading anda1 1 1 3’untranslated about1 7kbandcontainsl0exorls 9bp region.Thebovine(’阡j,genespans The isTATA-lessandcontainsseveral conserved as promoterreg

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