牛初乳对小鼠淋巴细胞的影响.pdf

摘要 摘要 目的；近几年，人们对于牛初乳的免疫调节作用进行了大量的研究，但多数研究方法简 单，可信度不强。利用现代免疫学实验技术及设备对牛初乳的免疫调节作用进行深入、细致、 客观的研究，验证牛初乳的免疫调节功效性，这必将对牛初乳保健食品的开发，以至于整个 乳业的发展具有重要的意义。本实验正是将流式细胞术、单克隆抗体技术、细胞荧光化学技 术相结合，并利用抗原抗体结合原理，采用流式细胞仪检测了小鼠外周血的T淋巴细胞亚群 和B淋巴细胞；同时采用琼脂糖凝胶电泳技术检测了牛初乳对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。从 而在免疫细胞数量和l免疫器官细胞凋亡两个方面评价了牛初乳的免疫调：常作用。 方法：本实验取雄性昆明小鼠40只，随机分为4组，每组10只。按牛初乳粉人体推荐 摄入量29／日／60Kg等效剂量的1、10、20倍设低剂量组、中剂量组、高剂量组和一个对照 组。低、中、高3个剂量组灌服牛初乳，对照组灌服等量的生理盐水，连续灌胃30天。在 末次灌胃24小时后，每组随机取8只小鼠，眼球取外周血，样品经处理后上机进行检测。 主要检测指标包括辅助性T淋巴细胞(Th)、抑制性T淋巴细胞(Ts)、B淋巴细胞，同时检测 了小鼠30天的增重、胸腺指数和脾指数。另取40只雄性昆明小鼠，随即分为5组，每组8 只。同样按牛初乳粉人体推荐摄入量29／日／60Kg等效剂量的1、10、20倍设低剂量组、中 剂量组、高剂量组及阴性对照组和阳性对照组。低、中、高3个剂量组灌服牛初乳，对照组 灌服等量的生理盐水，连续灌胃15天。在末次灌胃12h后，每组随机取5只小鼠，除阴性 对照组外，其余各组小鼠腹腔注射地塞米松25mg／kg，16小时后处死小鼠，取胸腺，琼脂糖 凝胶电泳检测细胞凋亡。 结果：(1)Th细胞数量各组间差异不显著伊口05)：各组间Ts细胞的数量差异亦不显著 伊n篮)；中剂量组的总T细胞数量与其它各组比较明显增多，与对照组比较差异显著伊 05)。(3)低剂量 晓卿(2)中剂量组B细胞数量明显降低，与其它备组比较差异显著伊n 组的体重增加高于其它各组，但增加幅度不大，各组间差异不显著伊以05)；(d)胸腺指数 各组间差异不显著伊口倒；中剂量组小鼠的脾脏指数明显降低，与其它各组间差异显著 沪n矧。(5)注射地塞米松后小鼠胸腺细胞DNA出现梯形条带，灌服牛初乳的各剂量组与 阳性对照组比较没有显著区别，而阴性对照组DNA聚集在加样孔附近，没有出现梯形条带。 结论：(I)中剂量组的总T细胞百分比数量显著增加，与对照组比较差异显著，说明中剂 量组小鼠的细胞免疫有所增强。(2)中剂量组小鼠的B细胞百分比数量明显降低，但是T细胞、 B细胞、和NK细胞百分比总和应等于100％的淋巴细胞，由于人和鼠的NK细胞很少，因此中 剂量组的T细胞百分数增多，B细胞百分数必然降低。同时由于免疫的复杂性以及B细胞发 挥体液免疫的功能在于其分泌的抗体，因此，B细胞百分比的下降并不能说明其体液免疫有 所下降。(3)没有发现小鼠灌食牛初乳后对体重的增加有影响。(4)灌服牛初乳对小鼠的胸腺指 数没有影响，但是中剂量组的脾指数明显下降，与其它各组差异显著，这是否与中剂量组B 细胞的百分比数量下降有关还不好下一个定论。(5)琼脂糖凝胶电泳检测没有发现牛初乳对地 塞米松所诱导的小鼠胸腺细胞凋亡有所影响 关键词：牛初乳：免疫调节；流式细胞术；单克隆抗体技术；淋巴细胞 EfrectOfBovineColostrumOn OfMice Lymphocyte Abstract recent haveconductedthemassiveresearch objectives：Inyears，the regarding people effectofbovine themostresearch was colostrums，but immunoloregulmion