2%2c3%27%2c4%2c5%27-四甲氧基二苯乙烯对子宫内膜癌细胞作用.pdf

中文摘要 7．四甲氧基二苯乙烯对子宫内膜癌细胞的作用 2，37，4，5 摘 要 目的：子宫内膜癌(endometrialcancer,EC)为起源于子宫内膜上皮的 恶性肿瘤，也是女性生殖道常见的恶性肿瘤之一，约占女性总癌症的7％， 占女性生殖道恶性肿瘤的20％～30％，近年来发病率和死亡率均有逐渐上 升的趋势，严重危害女性健康。作为一种性激素依赖性肿瘤，长期持续的 无孕激素拮抗的内源性或外源性雌激素刺激是目前比较认同的病因之一。 传统的治疗手段主要是手术治疗，辅以放疗、化疗、激素治疗，然而在肿 瘤化疗的过程中，抗癌药物在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常增殖细胞也有 杀伤作用，因而影响化疗的效果。所以如何使药物对肿瘤细胞最大限度的 杀伤，而对正常细胞毒性减少到最低的化疗方案成为人们关注的焦点之 一。近年来，肿瘤的分子靶向治疗越来越受到研究者的重视，也为开创子 宫内膜癌的新的治疗方法指明了方向。 激素相关的肿瘤组织中特异性高表达的酶，可代谢雌激素成为致癌产物， 激活芳香烃类前致癌物。已有研究发现，CYPlBl在子宫内膜癌组织中高 表达，而在相应的正常组织中低表达，表明CYPlBl在子宫内膜癌的发生 及发展的过程中很可能起重要的作用。2，3’，4，5’．四甲氧基二苯乙烯 殖和凋亡的影响，初步探讨其内在作用机制，为子宫内膜癌的靶向性治疗 提供新的思路。 方法： 1 5％C02饱和湿度培养箱中培养。以0．25％胰蛋白酶消化传代，于倒置显微 镜下观察细胞形态。 中文摘要 达情况：采用链霉素抗生物素蛋白一过氧化物酶连接 (Streptavidin／Peroxidase，SP)法。 3 程度的影响，绘制细胞生长抑制率曲线，并在倒置显微镜下观察用药前后 细胞形态学改变。 4应用流式细胞仪检测TMS对Ishikawa细胞凋亡和细胞周期的影响： 将浓度为2．5×105个／ml的细胞悬液接种于100ml培养瓶中，待贴壁后， umol／L)的TMS培养液，对照组 实验组加入不同浓度(10、20、40、80 加入等量的培养液。继续培养48h，用胰酶消化后收集细胞，70％的冷乙 la 醇固定，PI(50 Coulter公司生产)分析。 5 la 相应的FITC．IgG二抗(1：50稀释)孵育后，置流式细胞仪分析。 6运用统计软件SPSSl3．0对所有数据进行统计学分析：所有实验数据均 采用SPSS13．0软件进行统计分析，实验结果以x4-s表示，多组比较时， 方差齐者，采用单因素的方差分析，组间多重比较用SNK法；方差不齐 者，采用非参数检验，组间多重比较用Kruskal．WallisH法。P0．05表示 有显著性差异。 结果： 1 核中可见棕黄色颗粒，表明Ishikawa细胞中存在CYPlBl蛋白。 2不同浓度(10、20、40、80umol／L)的TMS分别作用于子宫内膜癌 差异显著(尸O．05)，且呈时间和浓度依赖性。 的Ishikawa细胞生长状态良好，细胞伸展，呈细长多边形、梭形，呈对数 生长，随时间推移，细胞逐渐增多，细胞接触紧密。当不同浓度(10、20、 40、80la 中文摘要 由梭形、多边形变成圆形，崩解坏死，细胞脱壁悬浮，细胞浆内出现空泡， 细胞间隙变大。并出现细胞质浓缩，变圆，细胞核浓缩、核碎裂等细胞凋亡 特征性形态学改变，但未见大量凋亡小体，凋亡细胞随着TMS浓度的增加 而增加，贴壁细胞密度随着TMS浓度的增加而降低。 4 u 同浓度(0、10、20、40、80 比随浓度的增加而增长。细胞周期中Go／G1期比例降低，G2／M期比例增 高，并随TMS浓度的增加而增加，呈剂量依赖性，差异有显著性意义 (PO．05)，可见细胞被阻滞于G2／M期。 5 1．t mol／L)TMS 影响：经FCM检测发现，不同浓度(O、10、20、40、80 显升高，呈剂量依赖性，不同浓度组间差异均有显著性差异(氏O．05)。