补阳还五汤及其有效部位对VEC表达血管活性物质和粘附分子影响及其信号转导机制研究.pdfVIP

中文摘要 目的：研究补阳还五汤及其有效部位(生物碱、苷)对凝血酶刺激 的VEC表达血管活性物质扣粘附分子的影响，探讨分子表达的信号转导 途径，从内皮细胞环节揭示该方抗血栓形成的物质基础及作用机制． ’ 不同浓度补阳还五汤原方、生物碱，苷；MTT法测定oD值，观察细胞活 力；比色法测定cDH活性，观察细胞损伤程度；重氮化反应法测定NO含 测定ET-1，RT-POR法检测ECE 胞PKC c【、 p38，NF～1cB和ERK表达的差异。 结果：①凝血酶可显著降低ECV-304细胞代谢活力，增加细胞的通 透性(尸0．05)，而补阳还五汤原方和有效部位生物碱和苷对凝血酶诱 导的内皮细胞活力下降和LDH漏出增加无显著影响(尸O．05)．②凝血 也可抑制凝血酶诱导的NO分泌的减少(户0．05)，生物碱和苷对此无抑 的释放(尸0。01)。④补阳还五汤原方和生物碱、苷对凝血酶诱导的内 1 O．05)，补阳还五汤及生物碱、苷对ECEmRNA表达也无显著影响(D- E-select in的灰度值降低(尸0．05)，提示三种粘附分子表达增强：与 凝血酶组比较，补阳还五汤原方组这三种粘附分子表达的灰度值均增高 二 8．05)，但对于E遗择素的表达无显著影响．④凝血酶可促进内皮细胞 PKC。【的表达(尸O．01)，而高、中剂量的原方、高弃IJ量的生物碱和三种 刺量的苷均可显著抑制PKCo【的表达(尸O。01一尸0，05)。⑦凝血酶 O．05)，补阳还五汤原方及有效部位生物碱和苷对磷酸化p38MAPK及磷酸 NF-K B的表达无显著变化(户0．05)，补阳还五汤原方及其有效部位亦 无显著影响(尸0．05)。 ； 结论：补阳还五汤可促使内皮细胞分；；晰张血管物质No和PGI：，对 缩血管物质ET-I的分泌无显著影响；补阳还五汤可下调内皮细胞粘附分 子的袁达，生物碱和苷可能是方中产生该作用的物质。对其机制研究表 明，凝血酶激活血管内皮细胞的作用主要是通过PKC活化而介导的， B信号通路并不是凝血酶活化血管内皮细胞的主要 p38MAPK、ERK，NF-lc 信号途径，补阳还五汤及其有效部位生物z／i,，苷可能通过抑制凝血酶激 活PKC信号途径而发挥其抗凝血酶活化血管内皮细胞的作用． 关键词：补阳还五汤；有效部位；生物碱；苷；血管内皮细胞o，血 管活性物质；粘附分子；信号转导；蛋白激酶c；丝裂素活化蛋白激酶，o 细胞外信号调节蛋白激酶；核因子一KB Its onthe of EffectofBYHWDandActiveFractions Expression andAdhesionMoleculesandIts VasoactiveSubstances InducedThrombininVECs Mechanism by effectofBYHW first ofthe wastoobservethe 0bJeot：Thepurposestudy onthe of substances decoctionanditsactivefractionsexpressionvaso—active moleculesinducedthrombinin