2012CB932500-G-肝癌治疗的新型纳米药物研究.docVIP

项目名称： 肝癌治疗的新型纳米药物研究 杨祥良 华中科技大学 2012.1至2016.8 教育部  肝癌被称为癌中之王，严重危害我国人民的生命健康，近几十年来，肝癌的药物治疗仍未取得性进展。（1）设计与构建新型纳米药物，肝癌生理屏障，提高肝癌靶向性 肝癌组织不规则脉管系统、组织间液高压、以及肝癌特殊的肝硬化病理特征胞外基质了肝癌复杂的生理屏障，导致抗肝癌药物不易穿透到离血管较远的，并且抗肝癌药物的非性杀伤对正常肝功能的破坏严重影响治疗效果。因此，设计、构建能突破肝癌生理屏障、对肝癌细胞具有良好靶向性的新型纳米药物是改善肝癌药物治疗效果的关键科学问题。 （降低肝癌细胞耐药性 肝癌细胞膜上固有的高表达ABC蛋白及肝脏独特的代谢，使肝癌对化疗药物普遍具有耐药性。最近研究表明，肝癌中存在的癌干细胞也是导致耐药的重要原因之一。因此，针对肝癌的耐药机理，设计、构建能降低肝癌细胞耐药性的新型纳米药物是改善肝癌药物治疗效果的又一个关键科学问题。 调控肝癌免疫微环境 肝脏先天具有免疫抑制特征，同时肝癌细胞分泌抑制性细胞因子，抑制树突状细胞的活化以及和NK细胞的功能，躲避免疫攻击，并且肝癌组织招募大量抑制性免疫细胞，造成了肝癌免疫逃逸。因此，发展调控肝癌免疫微环境的新型纳米药物改善肝癌药物治疗效果是本项目拟解决的第三个关键科学问题。新型的功能化纳米材料，构建安全、高效新型纳米药物新型纳米药物靶向肝癌细胞耐药性肝癌免疫机新型纳米药物体内过程与生物安全性运用纳米科学化学、生物等手段，从分子、细胞、组织和动物四个层次开展以下工作EPR效应的新型纳米材料，包括对热、pH、酶和氧化还原环境等快速响应或降解的两亲性嵌段聚合物，如二硫键桥联的聚酯和聚乙二醇（或聚乙撑乙基磷酸酯）的嵌段聚合物、腙键桥联的聚乳酸和聚乙二醇的嵌段聚合物、生物可降解纳米凝胶、脂质材料等，并进行化学组成和结构的鉴定及理化特性的表征。 ② 新型纳米药物的构建与表征 运用分子/粒子自组装、外场诱导组装（如微流控-乳液溶剂挥发法、Pickering乳化界面组装法）等先进技术，构建新型纳米药物载体（如纳米凝胶、聚合物胶束、纳米脂质体、固体脂质纳米粒、聚合物纳米粒和纳米泡等），负载突破生理屏障的辅助药物、化疗增敏剂、化疗药物或候选药物、免疫治疗药物等，发展具有突破肝癌生理屏障、靶向肝癌细胞、降低肝癌细胞耐药性的新型化疗纳米药物和调控肝癌免疫微环境的新型免疫治疗纳米药物，并对其粒径、形貌、表面电荷等理化特性进行表征，研究药物在不同介质条件下的释放特性。 ③ 新型纳米药物靶向肝癌细胞的机制研究 针对肝癌细胞表面特征分子，通过偶联特异性配体（如AFP受体单抗、iRGD多肽、Tf及其受体单链抗体等），构建靶向肝癌细胞的纳米药物，研究这些靶向分子的种类、密度等对纳米药物生物活性的影响，并阐明其对肝癌细胞的粘附、摄取过程的影响和规律，揭示其作用机制。 ④ 新型纳米药物突破肝癌生理屏障的机制研究 （2） 新型纳米药物降低肝癌细胞耐药性的机制和药效学研究 耐药细胞株考察纳米药物增殖凋亡细胞周期从细胞水平纳米药物的组成、结构和特性的关系新等变化，测定ATP、葡萄糖神经酰胺合成酶（GCS）谷胱甘肽S转移酶GST）等活性，检测多药耐药转运蛋白、细胞凋亡相关蛋白及其编码基因的改变，探讨新型纳米药物的组成、结构理化特性等对药物外排细胞解毒途径的影响。研究新型纳米药物与敏感细胞耐药细胞的结合/粘附、摄取、胞内滞留转运等过程经时变化规律，研究其入胞速度与程度、胞内分布与动力学，揭示新型纳米药物的组成、结构和特性对其入胞过程及胞内行为的影响，阐明其与之间的关系。纳米药物的组成、结构和特性研究新型纳米药物耐药动物模型从动物水平评价纳米药物胞耐药性的效果。 （3） 新型纳米药物调控肝癌免疫微环境的机制和药效学研究 ① 新型免疫治疗纳米药物清除Treg等的机制研究 以清除Treg的环磷酰胺构建新型免疫治疗纳米药物，研究其对模型小鼠肝癌组织中抑制性免疫细胞Treg等的清除作用及机理；清除作用的影响；揭示抑制性免疫细胞的清除对肝癌组织中DC、CTL和NK细胞等的数量及功能变化规律；阐明抑制性免疫细胞的清除对肝癌组织抑制性免疫因子表达的影响；观察荷瘤小鼠的存活时间及瘤重变化，并对肿瘤组织进行病理学分析，评价其肝癌治疗效果。 ② 新型免疫治疗纳米药物中和免疫抑制因子的机制研究 以负载抗TGF-β的中和抗体的新型免疫治疗纳米药物，研究其对免疫抑制因子TGF-β等的中和作用与机理，测定肝癌组织中TGF-β的表达与组织分布；中和作用的影响；阐明免疫抑制因子中和对肝癌组织中DC、CTL和NK细胞等及免疫抑制细胞Treg等的数量及功能变化影响的规律；观察荷瘤小鼠的存活时间及瘤重变化，并进行肿瘤组织病理学分析，评价其肝癌治疗效果。 ③