布加综合征大鼠模型肝脏中TNF-a和VEGF表达及意义.pdf

摘要 布加综合征大鼠模型肝脏中TNF—a和VEGF的表达及意义 研究生：赵云峰 导师：马秀现教授 郑州大学第一附属医院普外科 河南郑州450052 摘要 目的： 1．构建可靠、稳定的布加综合征大鼠模型，研究该模型疾病的发展变化；2． 研究布加综合征大鼠在不同时问段肝脏内TNF．a和VEGF的表达情况及意义。 方法： 1．采用下腔静脉缩窄法制作布加综合征大鼠模型：游离大鼠肝后段下腔静 脉周围组织，用0号丝线环绕结扎下腔静脉和L形23G钝头针，取下钝头针， 下腔静脉横截面积即缩窄约80％；2．选择健康雌性成年SD大白鼠120只(由河 南省实验动物中心提供)为实验研究对象，体重均约为4009，随机分为A组： 正常组即对照组；B组：假手术组；C组：手术组即模型组。每组40只，对照 组不给予手术处理；假手术组仅给予手术开腹分离肝后段下腔静脉；手术组采 用肝后段下腔静脉缩窄术复制布加综合征模型，分别于布加综合征模型建立后 1w、4w、8w、12w不同的时间点，各组随机处死8只，抽取下腔静脉血液制备 病理检查，其中的TNF．a、VEGF的表达水平的变化采用免疫组化技术检测。 统计学处理采用统计软件SPSSIO．0，实验数据以X土s表示。 摘要 结果t 1．下腔静脉缩窄法制各BCS大鼠模型，死亡率15％，第一周大鼠开始有腹 水产生，第四周彩超示：腹腔己开始有明显液性暗区，肝、脾肿大，下腔静脉 以及主肝静脉内有血栓形成，门静脉扩张，肝实质内可见广泛交通支开放，符 合BCS的影像学表现；肝功能及血常规结果符合布加综合征的检查；2．A、B组 大鼠血清TNF．a在各时间点均比较平稳，不随着时间的延长而有明显变化，A 组与B组的变化趋势基本一致，比较各时间的水平，B组大鼠并未因手术干扰 而在各时间点比A组有明显差异(Po．05)。C组大鼠血清TNF-a在各时间点呈 升高趋势，各时间点的总体水平可以看出都大于A组(P0．01)与B组(P0．01)， 结合大鼠肝脏病理变化，TNF．a在血清中的表达与肝脏纤维化程度正相关。3．A、 B组大鼠血清VEGF在各时间点均比较平稳，亦不随着时间的延长而有明显变 化，A组与B组的变化趋势基本一致，比较各时间点VEGF水平，B组大鼠并 未因手术干扰而在各时间点比A组有明显差异(P0．05)。C组大鼠血清VEGF 在各时间点呈升高趋势，各时间点的总体水平可以看出都大于A组(PO．01) 与B组Po．01)，结合大鼠肝脏病理变化，VEGF在血清中的表达与肝脏纤维化 程度正相关。4．C组大鼠肝组织内TNF．a表达在第l周开始升高，呈逐渐升高趋 势，各时间点TNF．a表达水平都高于A组及B组，统计有显著差异(PO．01)。 A组与B组各时间点的TNF．a表达水平则基本无变化，无明显差异(P0．05)。 5．C组大鼠肝组织内VEGF表达在第1周已明显升高，呈逐渐升高趋势，各时间 组肝组织内各时间点的VEGF表达水平基本无变化，无明显差异(P0．05)。6． 肝组织病理学检查：A组与B组大鼠各时间点肝组织镜下均为正常肝组织，而C 组大鼠8w、12w肝组织镜下可见肝小叶结构紊乱，广泛肝细胞脂肪变性、部分 坏死，汇管区扩大，纤维组织明显增生，有较粗纤维间隔形成，并延伸分割肝 小叶，随时间延长肝组织纤维化程度越重。 创新性： 1．首次在国内应用下腔静脉缩窄法制备出BCS大鼠模型： 2．首次检测TNF-Ix和VEGF在BCS大鼠肝脏中的表达情况； II 摘要 3．首次对BCS大鼠肝纤维化的进程进行动态观察。 结论： 1．采用下腔静脉缩窄术制作BCS大鼠模型，此种方法造模成功率高，死亡 率低，周期短，方法简单易行，成本低，适合大规模研究所需； 2．布加综合征大鼠模型血清及肝脏中的TNF．0【和VEGF水平与布加综合征 发病时间呈明显的同向增高； 3．布加综合征大鼠模型肝脏纤维化程度与肝脏中的TNF．伍和VEGF水平呈 正相关，TNF．a和VEGF在