SREBP小分子调节剂的发现及其作用机制研究.pdfVIP

摘要 肝脏中脂质的异位沉积是代谢综合征发病的中心环节, 与脂肪肝、2 型糖尿 病及并发症的发生相关。在肝脏中，固醇调节元件结合蛋白（Sterol Regulatory Element Binding Protein, SREBP ）是一类关键的核转录因子，可直接激活其下游 30多个参与脂肪酸，甘油三酯，胆固醇合成与摄取的基因表达，在脂代谢信号网 络中起着重要的调控作用。大量研究显示，SREBP参与胰岛素信号通路的组成， 同时在高脂血症、胰岛素抵抗、糖尿病及脂肪肝患者都高表达。靶向SREBP将会 成为有效的治疗相关代谢性疾病的新策略。 通过基于SRE （Sterol Regulatory Element ）元件的荧光素酶报告基因筛选 方法，我们发现了能够特异抑制 SREBP 转录活性新颖的结构小分子化合物 ZJ001 。ZJ001 能够抑制promotor 区含有SRE 序列的荧光素酶的活性，当SRE 序列的核苷酸发生突变时（C/A ），这种抑制效应被阻断。ZJ001 在体外处理能 够下调SREBP 及其靶基因的mRNA 水平，并抑制胆固醇和脂肪酸的从头合成。 ZJ001 长期治疗饮食诱导的肥胖小鼠后，其体重增长变慢，净增长显著减少； 白色脂肪组织重量显著减少。血浆中胆固醇的含量以及LDL/HDL 的比例显著 下降，减少了肥胖小鼠罹患动脉粥样硬化的风险； 经ZJ001 长期给药后肥胖小 鼠的肝脏重量减少，胆固醇和甘油三酯含量降低，预示 ZJ001 在一定程度上能 够改善脂肪肝。ZJ001 还增强了肥胖小鼠的葡萄糖耐受能力，改善糖代谢紊乱。 ZJ001 慢性给药后下调了肥胖小鼠肝脏内SREBP 及其下游靶基因的表达，然而 脂氧化基因未发生变化，提示ZJ001 主要通过抑制脂合成途径来起到降脂作用。 在这里我们阐明了 ZJ001 的可能降脂作用机制：通过促进肝细胞的线粒体呼吸 链解偶联减少ATP 的合成来激活AMPK ，后者抑制mTOR 的活性，从而减少 SREBP 以及脂合成的相关基因的mRNA 水平，进而降低细胞内脂肪酸及胆固醇 的含量，并且ZJ001 的降脂作用依赖于AMPK 。经ZJ001 慢性给药后肥胖小鼠 肝脏中的AMPK 和靶蛋白ACC 的磷酸化水平增加，mTOR 的磷酸化水平下降， 从体内验证了ZJ001 可能通过AMPK/mTOR 信号通路调节脂质的合成。 I 综上所述，我们发现了新颖小分子化合物ZJ001 能够通过AMPK/mTOR 信 号通路特异性地抑制SREBP 的转录，并在体外及体内都取得较好的降脂效果， 表明靶向SREBP 在治疗代谢性疾病具有巨大的潜能。ZJ001 可以作为治疗代谢 综合症的先导化合物。 关键词：ZJ001 ，SREBP，AMPK ，mTOR ，代谢性疾病 II Abstract Ectopic hepatic lipid deposition is a major point in the development of insulin resistance, nonalcoholic fatty liver (NAFLD), hyperlipidemia, atherosclerosis and other related complications induced by obesity. In liver, SREBP (sterol regulatory element binding protein) is a family of key nuclear transcription factors, which directly activate more than 30 genes dedicated to synthesis and uptake of fatty acid, triglyceride,