生化试剂的性能评估.ppt

Sysmex Corporation 生化试剂的性能评估 市场二部 张 明　　　　 医院实验室的现状 您了解自己正在使用的仪器、试剂性能如何吗？ 您了解到的试剂性能信息可靠吗？ 您对实验室的整套生化系统性能验证试验系统吗？ 试剂的性能 实验系统分析性能（试剂性能）的评价 1、评价精密度和准确度 2、测定的是不精密度和不准确度 3、评价实验——对误差的测定 分析误差类型： 随机误差(RE)或不精密度(imprecision) 系统误差(SE)或不准确度(inaccuracy) 恒定系统误差(CE) 比例系统误差(PE) 评估实验与分析误差类型的关系 分析误差 评估实验 的类型 初步实验 最后实验 随机误差 批内/批间重复性 天间重复性 线性实验 恒定误差 干扰试验 相关性实验 比例误差 回收实验 性能评估的实验分类 基本性能 批内、批间和天间的重复检测——不精密度 方法学比较实验——不准确度 总误差水平——不精密度加不准确度 检测系统自身的特性 病人结果的可报告范围——线性 回收实验——验证标准液的基体效应 分析灵敏度——可报告的最低结果范围 分析性能的其他内容 干扰试验——分析特异性 参考范围的建立 重复性实验对精密度的估计 标准差大小反映了检测系统的不精密度水平 批内标准差s应为美国临床实验室室间质量评估允许误差的1/4，天间标准差s为允许误差的1/3 美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)为临床化学产品（如试剂）的精密度性能评价出版了《EP-5文件》——求总误差 批内重复性 在同样的条件下，连续测定的重复性。 也可做为精密性的指标。 评价内容 测定次数 n 平均值 　mean 标准偏差 　S.D. 变动系数 　C.V.　　　　　　　　　　　　(SD/Mean×100％) 最大 　MAX 最小 　MIN 变动范围 　RANGE 天间重复性 在同样的条件下用同样的方法对同一样本在几天内测定时，确认各项测定值是否有变化。 方法学比较实验对准确度的估计 主要目的是获得新方法引入后的系统误差估计或偏倚，即准确度的评估 方法学比较实验必须与临床应用相结合 相关系数r估计数据分布范围是否可用于回归统计，不能作为判断方法性能可否接受的指标 相关性 确认与原有方法间的关系。 与原有方法同一天进行检测·比较。 评价内容 相关系数　　　r= 回归直线　　　y=ax+b 病人结果的可报告范围——线性检测 将样品作不同程度稀释和配制后，将预期值与实际检测值作比较，绘制在坐标纸上应呈一条通过原点、斜率为1的直线。直线所达的限值即为该方法的病人结果可报告范围。 病人结果的可报告范围应涵盖具有临床决定意义的值 线性范围宽的重要性 临床上检验科更重要的是在第一时间检测出结果异常的标本 特别是具有临床决定价值的异常值对临床的诊断和疾病的预后情况监测有很大帮助 肌酐（CRE） 参考值： 男： 44～133μmol/L 女： 70～106 μmol/L 临床意义： 肾病初期通常不变，只有肾功能严重受损，血清肌酐才 增高 增高2.5～5倍（300～700 μmol/L）——尿毒症可能 增高10倍（1330 μmol/L以上）——常见于尿毒症 线性范围的决定因素 试剂的线性范围主要取决于方法学 试剂的线性范围同时也取决于工具酶的浓度，酶的浓度、活性高，相应的线性宽。 主要的工具酶的浓度决定了试剂的成本价格。 肌酐检测方法 苦味酸法(Jaffe法) 酶法 肌酐检测原理（Jaffe法） Creatinine在碱性溶液中，与苦味酸反应后形成橙红色的肌酐苦味酸盐，并在约505nm的波长中用速率法进行检测和求得浓度。 特异性差，正常值比一般的酶法高约20~30%。 重复性不好、试剂开封后稳定性能。 存在受胆红素的影响而出现的假误差的问题和受容血影响出现的真误差的问题。 肌酐酶法的特征 检测敏感度高，可达到临床上对Creatinine的要求0.02mg/dL的检测方法。 是与参考方法HPLC法有着良好相关性的准确的检测方法。 特异性高。 不受干扰物的影响，尤其是几乎不受胆红素、溶血的影响。 也不受近来经常被使用的抗生素物质头孢霉菌素系列的影响。 试剂稳定性好（开封后1个月）。 线性好(100mg/dL)。 检测婴儿的Crea应该应用酶法,因为胎儿血红蛋白会造成结果假阴性 举例 肌酐的试剂中工具酶的浓度有很大差异: 肌酐试剂的线性范围达到7000～8000umol/L； 大部分国产