实验七基因表达研究的冰冻切片技术一、实验目的：为研究和.docVIP

实验七 基因表达研究的冰冻切片技术 一、实验目的：为研究和确定特定的基因在胚胎的哪些组织和细胞中表达，需要对胚胎进行切片后再进行基因表达的原位杂交。冰冻切片可以对新鲜胚胎和组织等进行快速切片以保持其蛋白质和mRNA 等大分子不被降解、变性，有利于对这些分子进行准确的细胞定位分析。本实验以受精后24h的斑马鱼胚胎为材料进行冰冻切片，以学习基因表达研究的冰冻切片技术。 二、实验器材与材料： 1、实验仪器和器材： MICROM HM525型冰冻切片机（图7-1），显微镜，28.5℃恒温水浴设备，恒温水浴锅，PH值测定仪。 培养皿，锡箔纸盒，载玻片，盖玻片等。 图7-1. MICROM冰冻切片机HM525外观 图7-2：冰冻切片机控制面板 1＝回退指示灯，2＝切片厚度设置键，3＝修片厚度设置键，4＝精细推进指示灯，5＝修整推进指示灯，6＝粗进，退回，7＝粗进，向前，8＝修片键，9＝滚屏键，10＝显示屏（左侧），11＝重置键，12＝记忆键，13＝解冻时间设置，14＝解冻程序中止，15＝向下键，热点元件激活，16＝向上键，17＝冷冻箱照明，18＝显示屏（右侧） 图7-3 冰冻切片机冷冻箱 图7-4.样品定位装置 图7-5 刀片运送器 1＝松紧摇杆，2＝松紧摇杆，3＝松紧摇杆，4＝标尺，5＝松紧摇杆，6＝螺纹旋扭，7＝刀片保护器，8＝隔离棒，9＝刀片插