格列本脲人工抗原的合成与鉴定.pdfVIP

200 2012，Vo1．33，No．01 食 品 科 孛 ※生物工程 格列本脲人工抗原的合成与鉴定 刘 盼，郑海涛，何计国 中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 100083 摘 要： 目的：合成格列本脲人工抗原。方法：采用对氨基苯 甲酸法制备半抗原，将半抗原分别与牛血清 白蛋 白 BsA 和卵清蛋白 OVA 通过碳二亚胺法偶联制备免疫原 Gli．BSA ~I]包被原 Gli．OVA ，利用紫外扫描进行抗原的 化学鉴定，通过免疫原免疫Balbc／小鼠，间接酶联免疫吸附法测定抗血清进行生物鉴定。结果：制备了Gli—BSA、 Gli—OVA的人工抗原，经紫外光谱扫描，偶联比分别为4：l和l7．7：1。免疫小鼠后获得抗血清的效价均达到32000 以上，半抑制质量浓度为 1O g／mL。结论：成功合成了格列本脲人工抗原，并获得了格列本脲抗体，为格列本 脲的免疫学检测方法进一步研究提供了实验基础。 关键词 ：格列本脲；半抗原；载体蛋 白；完全抗原 SynthesisandIdentificationofArtificialAntigenforGlibenclamide LIU Pan，ZHENG Hai·tao，HE Ji—guo CollegeofFbodScienceandNutritionalEngineering，ChniaAgriculturalUnNersity，Beijing 100083，Ctlina Abstract：0bjective：Tosynthesizeartificialantigenforglibenclamide．Mehtods：Haptenwassynhtesizedbydiazoreaction wihtp—aminobenzoicacid，nadconjugatedseparatelywihtBSA bovineserumalbumin nadOVA ovalbumin bycarbodiimide mehtod．Immunogenandcoatingnatigenwereobtainedna ddesignatedasGli—BSAandGli-OVA，respectively．Thesynhtesized artificialnatigenswereidentifiedbymassspectrometrynadUV specrtoscopy．Th eimmunogenwasusedtoimmunizeBalb／c micena dhtegeneratednati—serum wasnaalyzedbyindirectELISA．Results：Gli-BSA na dGli—OVAweresuccessfullysynthe- sizedwithacouplingratioof4：1nad17．7：1，respectively．Thena ti—serum titersafterthefrist，secondnadthirdimmunization ofBal~cmi cewereallabove32000nadhteICsowas10 g／mL．Conclusion：Artificialantigensforglibenclamidehasbeen successfullysynhtesizednadnati—glibenclamidenatibodieshavebeenacquired．Thisstudycanprovideabasisforfurthersutdies onimmunologicaldetectionofglibenclamide． Keywords：glibenclamide；hapten；carrierprotein；completeantigen 中图分类号：TS201．2 文献标识码：A 文章编号：1002—6630 2012 01—0200—04 格列本脲 ，又名优 降糖 ，作为第二代 的磺酰脲类