TNF-α联合IL-2诱导涎腺多形性腺瘤细胞凋亡的实验研究.pdfVIP

中文摘要 L一2诱导涎腺多形性腺瘤细胞凋亡 TNF—Q联合l 的实验研究 摘 要 目的：随着肿瘤发生的观念由细胞过度增殖扩展到细 胞不死，诱导肿瘤细胞凋亡己成为肿瘤治疗的新方向及研 究热点。涎腺多形性腺瘤是最常见的涎腺交界性肿瘤，有 明显潜在恶性，具有“好种植，易复发”的特点，多次复 发可导致癌变。本实验利用肿瘤坏死因子。a(Tumor necrosis IL．2)联合用药，在体外诱导涎腺多形性腺瘤细胞发生凋 亡，研究TNF．Q与IL．2联合诱导凋亡的时间及剂量效应， 并探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机理，为临床多形性腺瘤的 治疗提供新思路及可靠的实验依据。 材料与方法：1．材料：(1)细胞：人涎腺多形性腺 瘤细胞传代培养，取呈对数生长的第12代细胞进行实验。 (2)药品：重组人肿瘤坏死因子一Q(rhTNF．d)、重组 人白细胞介素II(rhlL．2)。2．方法：多形性腺瘤细胞在 RPMll640培养液(含10％的胎牛血清)中，37℃恒温孵 育。实验分两部分。第一部分：实验分四组：A组(1500U，／ml rhTNF—Q处理24h)、B组(1500U／ml rhn妤一Q处理48h)、 C组(1500U／ml rhTNF-Q处理72h)。各相应对照组分别加入生理盐水作 为溶剂对照。第二部分：E组(1500U／ml rhlL．2处理72h)， 相应对照组加入生理盐水作为溶剂对照。F1组(1500U／ml 中文摘要 rhIL．2处理72h)、F2组(1500U／ml rhTNF．a联合500U／ml 500U／ml 500U／mlrhIL．2处理72h)、F3组(1 rhTNF．Q联合1 rhIL．2处理72h)，其相应对照组 rhTNF．Q联合3000U／ml rhTNF．Q处理72h)。分别计数各组细胞数目， (1500U／ml 并应用流式细胞术检测各组凋亡率及细胞周期的分布情 况，利用光镜观察药物处理后的肿瘤细胞形态改变。 结果：1．A组细胞总数为130．33±4，73×104个，其 对照组为154．67±4．04×104个(P0．01)；B组细胞总数为 (PO．01)；C组细胞总数为262．33±15．50×104个，其对照 (P0．01)。E组细胞总数为386．67±12．86×104个，其对照 组为391．67±12．10×104个(P0．05)。F对照组细胞总数为 4-5．57×104个 104个(P0．01)；F2组细胞总数为193 2．流式细胞术检测A、B、C三个实验组均有特征性的 凋亡峰形成。A组凋亡率为10．30±0．46％，其对照组为 照组为3．20±0．40％(Po．01)；C组凋亡率为16．57± 0．6l％，其对照组为5．20±0．50％佃O．011。A、B、C三 个实验组间有显著性差异(P0．01)。另外，随处理时间的 不同，各组的细胞周期分布发生改变。D组凋亡率为9．20 ±O．36％，其对照组为5．20±O．50％(P0．01)。同时，部分 细胞对碘化丙啶染色剂通透性增加，表现为染色增强，提 2 中文摘要 示部分细胞发生坏死。E组凋亡率为5．03±o．75％，其对 3．TNF。Q与IL，2联合诱导后多形性腺瘤细胞形态的改 变：光镜观察发现大量多形性腺瘤细胞胞浆皱缩，胞核染 色质固缩，呈大小不等的点状，表明凋亡的发生。 结论：1．TNF．a可诱导体外涎腺多形性腺瘤细胞发 生凋亡。2．IL一2可增强TNF．Q诱导涎腺多形性腺瘤细胞 凋亡的效能。3．TNF．Q与lL．2联合诱导多形性腺