长春瑞滨在大鼠中的药动学研究中快速而灵敏的LC-MS方法.pptVIP

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2017-09-05 发布于重庆
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长春瑞滨在大鼠中的药动学研究中快速而灵敏的LC-MS方法.ppt

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Biomedical Chromatography 《生物医学色谱》 2009-04 Tiefeng Cheng Duanyun Si et. LC-ESI-MS法是测量大鼠血浆中长春瑞滨的快速而灵敏的方法 100μL血浆经蛋白沉淀和Inertsil ODS-3 C18柱（2.1×50mm，id.5 μ m）4min处理长春瑞滨（V）和长春碱（IS）的选择性检测离子（SIM） [M+H]+分别为m/z 779 和m/z 811 V标准曲线的线性范围1~1000ng/mL，定量下限1ng/mL 长春瑞滨是从长春花类生物碱中提取出的一种半合成长春花生物碱，主要用于治疗非小细胞肺癌，乳腺癌等，与长春碱比，具有高治疗指数，低神经毒性的特点以往方法：LC-MS 或 LC-MS/MS 样本量：500 μL 时间： 15~20min 本实验： LC-ESI-MS 样本量：100 μL 时间 4min 此方法适用于大样本量分析 HPLC：Inertsil ODS-3 C18 (2.1×50mm，id.5 μ m)色谱柱流动相：甲醇：10mmol/L醋酸铵缓冲液，含1.0%甲酸（65/35,v/v）质谱：SIM模式，电源电压：3kV；柱温：250℃；柱电压：32V；鞘气体，副气体为氮气，流速分别为0.5L/min和0.08L/min 大鼠尾静脉注射10mg/Kg长春瑞滨血样采集：眼静脉丛；时间：给药前，给药后5，15，30，45min，1，2，4，8，12，24，48，72h 血浆样本+200 μL IS标准溶液，涡旋0.5min，6000g离心5min，上清转移至新管，40℃下氮气吹干，所得残渣加100 μL 流动相复溶，涡旋0.5min， 6000g离心5min，10 μL进样。药动学参数经DAS2.1软件计算；房室模型：二室 V和IS的[M+H]+峰分别为m/z 779和m/z 811 V的线性回归标准曲线为y=0.00384+0.00481c (权重系数：1/c2) r2=0.995 线性范围1~1000ng/mL 2，20，500ng/mL长春瑞滨回收率95.9%，86.8%，100.0%；IS回收率94.4% V的定量下限1ng/mL，准确度93.3+4.8% RSD=5.1% T1/2 β=15.0 ±1.9h; AUCo-t=344.5 ±380.6ng*h/mL LC-ESI-MS法与LC-MS法比较更方便快捷，只需100 μL样本，4min 1~1000ng/mL浓度范围内具有特异，准确，稳定的特点，定量下限1ng/mL 此法适用于临床药代动力学研究