Omi%2fHtrA2在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义.pdfVIP

中文摘要 0m i／HtrA2在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义 摘 要 目的：口腔鳞状细胞癌(简称口腔鳞癌)是发生在口腔粘膜的最常见 的恶性肿瘤，约80％的口腔粘膜恶性肿瘤病理类型为口腔鳞癌，占头颈部 恶性肿瘤的40％左右，但其发病机制尚未研究清楚，治疗和诊断手段单一， 因此深入了解口腔鳞癌的发病机制，并在此基础上探索早期发现并且能早 期诊断、早期治疗的方法是十分迫切的。 A，IqtrA)属于丝氨酸蛋白酶家族的一员，是存在于细菌体内的 requirement 一种蛋白质。2000年，研究者在哺乳动物细胞中观察到一种和HtrA相似 达质粒对Omi进行纯化，将其命名为HtrA2。已有许多学者研究观察到 Omi／HtrA2在多种人癌细胞系中高表达，例如肝癌、胃癌、前列腺癌、喉 癌等，但是Omi／HtrA2在以上各种癌细胞中的高表达与癌细胞凋亡、增 殖以及生长的关系及其相互之间的作用机理尚未得出统一的结论。本实验 的目的是检测Omi／HtrA2蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达，初步探 讨其在口腔鳞状细胞癌的发病中所起的作用，为口腔鳞癌患者的早期诊 断、早期治疗、恶性程度分析以及预后判断找到新的突破点。 方法：收集我院2010年10月．2011年06月间口腔鳞状细胞癌标本、 膜上皮异常增生标本各50例。所有患者手术前均局部取检经病理证实， 患者术前未经治疗。标本均为术后立即取材，一式两份，一份固定于4％ 甲醛中，送病检；一份置．80℃低温冰箱中编号保存备用。 腔粘膜组织和口腔鳞状上皮异常增生组织中的表达 操作说明进行操作，光镜下观察，染色背景清晰，胞浆呈黄棕色为阳性， 比较各组间Omi／HtrA2蛋白表达的差异是否有统计学意义。 2 腔粘膜组织和口腔鳞状上皮异常增生组织中的表达 中文摘要 Trizol法抽提总IUNA，所提取的总I斟A经琼脂糖凝胶电泳鉴定，并经紫 外分光光度计定量。将提取的RNA按逆转录试剂盒说明合成eDNA第1链。 进行目的基因的扩增，扩增产物以GAPDH基因作内参，用凝胶成像系统 进行观察及图像采集。电泳扫描观察结果，在相应位置上可见特异性的 One软件灰度扫描定量分析结果。 DNA条带。运用Quantity 3结果判断标准 3．1免疫组织化学 Omi／HtrA2染色阳性为胞浆出现棕黄色颗粒，以免疫组化半定量法评 价其表达。 3．2Omi／HtrA2基因表达水平的半定量分析 以目的产物与GAPDH的条带进行灰度扫描得其相对表达量。 4统计学方法 应用SPSSl3．0统计软件包进行分析，采用刀检验、多个均数比较的 方差分析、SNK两两比较3种方法进行检验，以P0．05为差异有统计学 意义。 结果： lOmi／HtrA2在口腔鳞癌组织、癌旁组织、正常口腔粘膜组织和口腔鳞状 上皮异常增生组织中的表达 口腔粘膜正常组织组最低，为12％(6／50)，经卡方检验差异有统计学意 义(pO．05)。 2Omi／HtrA2在口腔鳞癌组织、癌旁组织、正常口腔粘膜组织和口腔鳞状 上皮异常增生组织中RT．PCR检测结果 Omi／HtrA2的灰度值最高的是口腔高分化口腔鳞癌组织组，其次是低 分化口腔鳞癌组织组、口腔粘膜异常增生组织组、口腔鳞癌癌旁组织组， 灰度值最低的是正常粘膜组织组，它们的灰度值分别是12．5100一+0．1454、 基因在五种组织中的表达量间差异有统计学意义(F=1841Z435，p=0．ooo)， SNK法两两比较表明，高分化口腔鳞癌组中的表达均高于低分化口腔鳞 癌组织、口腔粘膜异常增生组织、口腔鳞癌癌旁组织和正常粘膜组织，差 中文摘要 达存在显著差异，呈递减趋势，与免疫组化结果相符合。 ． 3口腔鳞癌组织中Omi／HtrA2的表达与病理分级的关系 细胞分化程度有关，高分化鳞癌组织中的表达最高(PO．05)。 4口腔鳞癌组织中Omi／HtrA2的表达与临床特征的关系 同性别、年龄和肿瘤的临床各个分期之间的差异无统计学意义(PO．05)。 结论： 1 的表达存在显著差异，呈现递减趋势，3组间