四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及机.ppt

四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及机制研究 许颖智，张军平，李 明，彭 立，李良军， 张光银，杨 萃，周亚男 天津中医药大学第一附属医院 研 究 背 景 治疗现状 调脂、抗血小板聚集、介入性冠状动脉治疗、冠状动脉旁路移植术等血管再通治疗 但是每年仍有约两千万人死于急性心血管事件 亟待解决的问题 怎样稳定易损斑块，保护血管，是当前研究的重点和难点 围绕机制，开发思路，深入研究，使中医药在AS治疗彰显优势 中医药具有多靶点、多途径的整体调节作用 中医AS病机认识 滋阴解毒活血－四妙勇安汤 四妙勇安汤最早见于华佗《神医秘传》，曰:“内服药用金银花三两，玄参三两，当归二两，甘草一两，水煎服。” 清代医家鲍相敖将此方命名为“四妙勇安汤”，收载于《验方新编》中，具有清养结合、毒瘀并驱的功效，清解络中之毒，化解络中之瘀，滋养络脉之体 临床应用：周围血管病、下肢闭塞性动脉粥样硬化、冠心病 作用机制：抗凝、抗氧化、促血管内皮细胞增殖作用 动脉粥样硬化？途径？  造模方法 评价指标 血脂 病理形态 纤维帽厚度 脂池面积 炎症因子 易损指数 新生血管 实验结果1.复合造模对血脂及ox-LDL影响 研究方法 易损斑块动物模型建立成功后，以辛伐他汀（5mg/kg)作为阳性对照，观察四妙勇安汤对模型病理形态、易损指数、斑块内细胞外基质的影响，明确其稳定斑块的作用机制。 评价指标 讨 论 运用复合因素造模方法建立兔AS斑块模型，并从血脂、血清炎症标志物、主动脉病理形态、纤维帽厚度、斑块内炎症反应、脂质成分、血管新生、胶原含量、易损指数等方面综合分析，证实建模成功 依照动脉粥样硬化斑块不稳定 “阴虚毒瘀”的中医病机。运用具有滋阴活血解毒之功效的四妙勇安汤对动脉粥样硬化模型兔进行干预，明确其稳定AS易损斑块的作用机理 讨 论 四妙勇安汤可延缓血管壁的病变进展，降低内膜厚度及脂核面积、增加纤维帽厚度 抑制降低斑块内脂质含量、使具有收缩功能的平滑肌增多、增加胶原含量，从而降低易损指数，使斑块趋于稳定状态 讨 论 抑制斑块内细胞外基质降解 抑制MMP-9表达 可能与NF-κB细胞信号通路有关 是否还涉及到其它信号通路及通路的上下游基因的初步表达情况如何还需要进一步探讨 * * WHO 发达国家 低、中等收入国家 1000万 1900万 死于心血管疾病的患者数目 500万 600万 2007年，271.6万人死于CVD。 每天有7420人死于CVD， 11.6秒死亡1例。 罪犯斑块不在于斑块大小而是斑块结构、成分 斑块破裂 70% 急性心脏事件的病理因素 易损斑块形成过程及病理特征 thin fibrous cap (65um) big lipid core inflammatory neoangiogenesis 易损斑块形成过程及病理特征 extracellular matrixde gradation 毒瘀 滋阴解毒活血 脂质 炎症反应 血管新生 痰 瘀 热毒 虚阴 一、动脉粥样硬化易损斑块 模型建立 1w 4w 经股动脉球囊拉伤术 开始予高脂饮食100g/d 牛血清白蛋白250mg/kg 2w 取材 10w 维持高脂饮食 经股动脉球囊拉伤术 左肾动脉 左髂总动脉 右肾动脉 右髂总动脉 主动脉弓 球囊（压力约为2个大气压） 左股动脉 备皮 插管 缝合 造模后TC、LDL-C、 ox-LDL成增高趋势。 2.复合造模对血清炎症因子水平影响 与对照组比较* P0.01 造模因素干预后，血清炎症因子明显增高，CRP明显增高 3.复合造模对内膜的影响 M Z HE染色(100倍) 造模因素干预后，内膜明显增厚，纤维帽变薄,形成AS斑块 4. 复合造模对脂核、易损指数影响 与对照组比较 * P0.01 VI=(ELA+CD68)/(CA+SMA) 造模因素干预后，脂核增大，细胞外脂质增加，炎症细胞增多，平滑肌细胞减少，胶原纤维增多；易损指数增大 Z M Z M Z M Z M 造模因素干预后，脂核增大，细胞外脂质增加，炎症细胞增多，平滑肌细胞减少，胶原纤维增多；易损指数增大。 Masson染色(100倍) 油红O染色(400倍) CD68免疫组化染色(DAB显色，400倍) α-SMA免疫组化染色(DAB显色，400倍) 5. 复合造模对脂核、易损指数影响 6.复合造模对斑块内CD31及VEGF表达的影响 CD31 造模因素干预后，斑块内可见内皮细胞组成的连续或不连续的小管腔,CD31和VEGF表达呈强阳性。 VEGF 免疫组化染色(DAB显色，400倍) Z M Z M 小 结 本实验模拟