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第九章 蛋白质组研究中的翻译后修饰 1. 磷酸化蛋白质组研究 1.1 概况 1.1.1 蛋白质磷酸化 蛋白质可逆磷酸化在调节信号转导过程中有重要作用，是细胞生命活动的调控中心。是泛指把磷酸基团通过酶促反应转移到其他化合物的过程。则是指由蛋白激酶催化的把ATP或GTP γ位的磷酸基移到底物蛋白质氨基酸残基上的过程，其逆转过程是由蛋白磷酸酶催化的，称为。蛋白激酶 (Protein kinasePK)催化蛋白质的含羟基氨基酸丝／苏和酪的侧链羟基形成磷酸酯。蛋白质磷酸酯酶 (Protein phosphatasePPase) 催化磷酸蛋白的磷酸酯键水解而去磷酸化。细胞内任何一种蛋白质的磷酸化状态是由蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶的两种相反酶活性之间的平衡决定的。1.2 磷酸化蛋白质组研究策略 在蛋白质的磷酸化研究中，样品制备1.3 磷酸化蛋白质的富集策略 1.3.1磷酸化蛋白质的富集 ⑴ 磷酸化蛋白质抗体 1.3.2 磷酸化肽段的富集策略 1) 固定金属螯合亲和层析 IMAC技术最初用于纯化含组氨酸的蛋白质，现在常被用于选择性地富集磷酸化肽段，对磷酸化蛋白质的富集无效。 IMAC柱填料的基本构成是色谱填料-交联剂-金属螯合剂。色谱填料与金属螯合剂亚氨基二乙酸或次氮基三醋酸交联成为固定相，常用的金属离子Fe3+、Ga3+或Cu2+等被螯合到固定相上。磷酸基团与固相化的金属离子通过静电作用吸附，可选