利用Gateway技术构建黄瓜HPL基因的RNA干扰载体.pdfVIP

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2017-09-04 发布于重庆
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利用Gateway技术构建黄瓜HPL基因的RNA干扰载体.pdf

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西北农业学报，（）：２０１３２２２１５２１５８　－ＡｃｔａＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｅＢｏｒｅａｌｉｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓＳｉｎｉｃａ　ｇ　－　＊ ? 利用Ｇａｔｅｗａ技术构建黄瓜ＨＰＬ基因的ＲＮＡ干扰载体ｙ，，，，，，，王聪颖陈书霞陈巧郝丽宁孟焕文万旭花申晓青程智慧　（，，）西北农林科技大学园艺学院农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室陕西杨凌７１２１００（），摘要为探讨黄瓜脂氢过氧化物裂解酶基因ＨＰＬ下调表达对黄瓜果实挥发性醛类物质合成的影响设　　，，。计对特异引物以黄瓜质粒为模板通过扩增出的片段利用基于同源重组１ＤＯＮＲ２０１ＨＰＬＰＣＲ３２３ｂｐ－ｐ，。原理的技术将扩增的片段通过反应连接到入门载体中对扩增出的的片ＧａｔｅｗａＢＰＤＯＮＲ２０１３２３ｂｙｐｐ，。，段进行测序测序结果显示该序列与原序列同源性为１００％在此基础上通过ＬＲ反应将目的片段插入过表，，达的植物干涉载体构建黄瓜基因的表达载体分别经限制ＲＮＡＨｅｌｌｓａｔｅ８ＨＰＬＲＮＡｉＨｅｌｌｓａｔｅ８ＨＰＬｉｐｇｐｇ－、，。性内切酶酶切后获得的片段与预期结果一致采用热击法将转化ＸｈｏＸｂａ３２３ｂＨｅｌｌｓａｔｅ８ＨＰＬｉ Ⅰ Ⅰ ｐｐｇ－