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中 国 医 学 科 学 院 学 报
ＡＣＴＡＡＣＡＤＥＭＩＡＥＭＥＤＩＣＩＮＡＥＳＩＮＩＣＡＥ
·论 著 ·
小鼠睾丸曲细精管生精上皮的分离及形态观察
付 俊，缪时英
中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京 １００００５
通信作者：缪时英 电话：０１０电子邮件：ｍｉａｏｓｈｉｙｉｎｇ＠ｉｍｉｃａｍｓａｃｃｎ
摘要：目的 寻找一种简单可行的研究精子发生过程中蛋白质定位的方法。方法 将新鲜的小鼠睾丸去除白膜，
通过胶原酶 及ＤＮＡ酶 的作用分离各种细胞。细胞经简单处理后以合适的浓度铺片，进行荧光染色，并于共聚焦荧
Ⅰ Ⅰ
光显微镜下观察。结果 通过分析特异的染料对顶体和细胞核染色的结果，可以分辨出各个阶段的生精细胞。结论 建
立了一种研究精子发生过程中蛋白质定位的简单、可靠的方法。
关键词：精子发生；顶体形成；细胞核
中图分类号：Ｑ２４７ 文献标志码：Ａ 文章编号：１０００５０３Ｘ（２０１１）０６０６２９０３
ＤＯＩ：１０３８８１／ｊｉｓｓｎ１０００５０３Ｘ２０１１０６００９
ＳｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＭｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌＯｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆＭｏｕｓｅＴｅｓｔｉｓ
ＳｅｍｉｎｉｆｅｒｏｕｓＴｕｂｕｌｅＥｐｉｔｈｅｌｉｕｍ
ＦＵＪｕｎ，ＭＩＡＯＳｈｉｙｉｎｇ
ＮａｔｉｏｎａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，
ＣＡＭＳａｎｄＰＵＭＣ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００００５，Ｃｈｉｎａ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＭＩＡＯＳｈｉｙｉｎｇ Ｔｅｌ：０１０Ｅｍａｉｌ：ｍｉａｏｓｈｉｙｉｎｇ＠ｉｍｉｃａｍｓａｃｃｎ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅａｓｉｍｐｌｅａｎｄｆｅａｓｉｂｌｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅｔｏｌｏｃａｔｅｐｒｏｔｅｉｎｓｄｕｒｉｎｇｓｐｅｒｍａｔｏ
ｇｅｎｅｓｉｓＭｅｔｈｏｄｓ ＶａｒｉｏｕｓｇｅｒｍｃｅｌｌｓａｎｄｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅＩａｎｄＤＮａｓｅＩａｆｔｅｒｔｈｅ
ａｌｂｕｇｉｎｅａｗａｓｒｅｍｏｖｅｄＴｈｅｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｈｅｎｓｍｅａｒｅｄ，ｄｙｅｄ，ａｎｄｏｂｓｅｒｖｅｄｄｉｒｅｃｔｌｙｕｎｄｅｒｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅａｎｄｃｏｎ
ｆｏｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙＲｅｓｕｌｔｓ Ｇｅｒｍｃｅｌｌｓａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｔｅｐｓｗｅｒｅｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｓｐｅｃｉｆｉｃｄｙｅｓｔｕｆｆｓｆｏｒ
ａｃｒｏｓｏｍｅａｎｄｎｕｃｌｅｏｌｕｓＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ａｓｉｍｐｌｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｌｏｃａｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓｄｕｒｉｎｇｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓｗａｓｓｕｃ
ｃｅｓｓｆｕｌｌｙｄｅｖｅｌｏｐｅｄ
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓ；ａｃｒｏｓｏｍｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ；ｎｕｃｌｅｏｌｕｓ
ＡｃｔａＡｃａｄＭｅｄＳｉｎ，２０１１，３３（６）：６２９－６３１
哺乳动物的精子发生是一个复杂的细胞分化过 阶段是初级精母细胞经第 １次减数分裂形成次级精
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