EGF在新生大鼠原始卵泡生长启动中的作用.pdfVIP

( C 辑) 第30 卷 第3 期 SCIENCE IN CHINA ( Series C ) 2000 年6 月 EGF 在新生大鼠原始卵泡生长启动中的作用* 柳海珍 刘以训** ( 中国科学院动物研究所生殖生物学国家重点实验室, 北京 100080) 摘要 以灵敏的增殖细胞核抗原(PCNA)为指标, 研究了表皮生长因子(EGF)和 FSH 对新生大鼠原始卵泡生长启动的作用. 结果表明, 注射 EGF 两天, 卵巢中有较多的卵 泡颗粒细胞(GC)开始增殖由扁平变为立方形, 到第 4 天时 GC 的增殖状况和层数更加 明显; 而 FSH 对卵泡启动在早期无明显作用, 直到第 7 天时才有明显结果. 原位杂交 显示, 抑制素 mRNA 从出生后第5 天开始表达, FSH 受体(FSHR)从第6 天开始表达, 随后逐渐增强. 提示EGF 而不是FSH 对原始卵泡的生长启动可能起一定的作用, 抑制 素也可能参与卵泡的早期发育过程. 关键词 增殖细胞核抗原(PCNA) 免疫组化 原位杂交 抑制素a 亚基 原始卵泡 哺乳动物的卵巢是由数以万计的原始卵泡组成, 它们是卵子的储藏场所. 原始卵泡由一 [1] 层扁平的原始 GC 和一个未分化的卵母细胞组成 , 其寿命在人类可长达 50 年. 某些静止原 始卵泡一旦启动, 经一系列生长, 分化成为优势卵泡, 最终导致排卵; 或者在发育分化的某一 阶段闭锁. 原始卵泡主要位于卵巢皮层最外层, 几乎没有血管分布, 而生长的卵泡占据了血管 [1] 非常丰富的皮层内层区域 . 在卵泡生长启动中首先观察到原始 GC 由扁平变成立方形, 并开始增殖, 围绕其内的卵 [2] 母细胞也开始生长 . 有趣的是, 某些原始卵泡能够启动生长, 而其邻近的卵泡却保持静止, 这种信号选择机制至今仍不清楚. 近来的研究认为, 性腺外的因子对这一过程可能不起重要 作用[3]. FSH 在调节卵泡生长和 GC 分化中的生理作用已很清楚, 但其作用机制还不明了. 多种 肽类生长因子能直接刺激培养下的 GC 增殖, 提示旁分泌和自分泌调节非常重要. Eppig 等人 应用新生小鼠卵巢培养 8 d 后, 分离其卵母-卵丘细胞复合体继续培养 14 d, 结果表明对照组 与 FSH 组仅有 50%~60%的卵细胞恢复生长, 而 EGF 组却有 90 以上的卵母-卵丘细胞复合 体恢复生长, 但EGF 对培养 6 d 的小鼠卵巢中分离的细胞复合体作用并不明显, 这表明 EGF [3] 有利于早期卵细胞存活 , 但其作用机制并不确定. 卵泡 GC 的分化和生长是原始卵泡生长 启动的关键, 而 GC 的分化可能与卵巢基质分 泌的EGF/TGF-和 IGF- 类生长因子的作用有关. 关于多肽类生长因子促进 GC 增殖和卵母 1999-05-06 收稿, 1999-07-13 收修改稿 * 国