水稻黑条矮缩病毒基因组S7编码的2个非结构蛋白在病株中的表达检测.pdfVIP

水稻黑条矮缩病毒基因组S7编码的2个非结构蛋白在病株中的表达检测.pdf

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国水稻科学 (Ch iJRi(es(1i),2012,26(1):9 15 htt1)://www.ricesci.cn I)()1:10.3969/j.issn.1O017216.2012.01.003 水稻黑条矮缩病毒基因组 S7编码的2个非结构蛋 白在病株 中 的表达检测 吕明芳 。 羊健 张恒木 陈剑平。_ (。浙江师范大学 化学与生命科学学院,浙江 金华 321004;:浙江省农业科学院 病毒学与生物技术研究所 /浙江省植物有害生物防控 国家重点实验室培育基地 /农业部植物保护与生物技术重点开放实验室/浙江省植物病毒重点开放实验室,浙江 杭州 31002l;通讯 联系人 ,E—mail:jpchen200l@yahoo.coin.cn) DetectionofTwoNonstructuralProteinsEncodedbyGenomeSegmentS7of RiceBlack—Streaked Dwar2f’VirusinInfectedRicePlants I.uMing—fang_0.YANGJian0.ZHAN(Heng—mu。。CHENJian—ping · t1CollegeoJ (7heillistryaTldLi和 scien~e.zhejiangNormalUniversity jinhua321O04,C/Iina;2StateKeyLaboratoryBreeding Base/orZhejiangSustainablePestandDisease(?ontrol/KeyLaboratoryoJPlantPrate(1ionandBiole(hmflogY,MinistryfJ,A r甜“— ture/ZkejiangProvim’ialKeyLaboratoryfJ,Pla~ltVDology/InstituteoJVirologYandBiot“hnology,ZhejiangA(ademyo.,Ag 一 (“f“r“,S(,ieles.HangghOlg310021.China; Correspo~idingautI~or,E-.“ :Jp(he*~O01(yalloo.(0,”.cn) IU M ingfang,YANG Jian,ZHANG Hengmu,eta1.Detection oftwononstructuralproteinsencodedbygenome segmentS7ofRiceblack—streaked (,uⅥr,’+virusininfectedriceplant.ChinJRiceSci,2O12,26(1):915. Abstract:ThegenomesegmentS7ofRi(e z“ck—streakeddTz~arJ rus(RBSDV)containstwonon—overlappingmajor openreadingframes(()RFs),whichencodedtwoproteins,p7aandp7b.respectively.BasedonthesequenceofS7 (EU1l1804),twopairsofS7一specificprimersweredesignedandrespectivelyused toamplify thefragmentsencoding thep7aandp7bproteins.Theexpectedproductsweresub—clonedintotheexpressionvectorpET 32a(+ )orpSBET andexpressedathigh levelinE.coliBI21(I)E3)plysS or13I21(DE3)pIysE,respectively.An antiserum specifically againstt37aorp7b proteinswasprepared using the purified expression proteinsto imm unize mice.Theresultsof W esternblotrevealedthatboth p7aandp7b proteinswereexpressed in infectedplants,and 1)7aproteinwasmore abundantandeasilydetectedthanp7bprotein.However,bothhavenotbeendetectedintheviralparticles,indicating

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