【发酵工程】余龙江版 第3章_发酵工业培养基的设计.pptVIP

本章内容 常用培养基的基本要求 培养基的成分及来源 培养基的类型与区别 影响培养基质量的因素 培养基的设计 第三节 培养基的类型 斜面培养基或孢子培养基 种子培养基 发酵培养基 3.1 孢子培养基 要求：能使菌体生长快，产生孢子数量大、质量好，且不会引起菌种变异。 特点 C、N源不宜多，否则只长菌丝，少长或不长孢子； 无机盐浓度要适当控制，否则会影响孢子的颜色和孢子量。 3.2 种子培养基 要求 营养丰富、完全，氮和维生素的含量高些； 培养基中加入一些易于吸收利用的快C、N源，便于孢子发芽生长，保证球形； pH要稳定； 最后一级尽可能接近发酵培养基，常加入少量发酵合成期才大量需要的物质。 3.3 发酵培养基 目的：使接种菌丝生长并能高效表达，获得高的发酵产量，同时组分尽可能单一，以保证高的得率。 要求 营养丰富完全，有利于产物合成； 不能大量加入快C、快N源，应和慢C、N源相结合； 在产物分泌期间，pH 稳定； 加入适量合成所需的物质，如前体等，进行定向发酵； 采用中间补料，以提高发酵单位； 原料的考虑——成本问题 响应面优化培养基配方 1、确定主要因素 Plackett-Burman设计法 Plackett-Burman设计 Plackett-Burman试验就是筛选试验设计，主要针对因子数较多，且未确定众因子相对于响应变量的显著影响，采用的试验设计方法。方法主要通过对每个因子取两水平来进行分析，通过比较各个因子两水平的差异与整体的差异来确定因子的显著性。筛选试验设计不能区分主效应与交互作用的影响，但对显著影响的因子可以确定出来，从而达到筛选的目的，避免在后期的优化试验中由于因子数太多或部分因子不显著而浪费试验资源。 响应面分析 试验设计与优化方法，都未能给出直观的图形，因而也不能凭直觉观察其最优化点，虽然能找出最优值，但难以直观地判别优化区域．为此响应面分析法（也称响应曲面法）应运而生．响应面分析也是一种最优化方法，它是将体系的响应（如发酵过程中的工艺条件）作为一个或多个因素（如基质浓度、酸度等）的函数，运用图形技术将这种函数关系显示出来，以供我们凭借直觉的观察来选择试验设计中的最优化条件． 用法：前体使用时普遍采用流加的方法 前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07% 前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化； 流加也有利于提高前提的转化率 3、产物促进剂 所谓产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。 促进剂提高产量的机制还不完全清楚，其原因是多方面的。 有些促进剂本身是酶的诱导物； 有些促进剂是表面活性剂，可改善细胞的透性，改善 细胞与氧的接触从而促进酶的分泌与生产， 也有人认为表面活性剂对酶的表面失活有保护作用； 有些促进剂的作用是沉淀或螯合有害的重金属离子。 五、水 对于发酵工厂来说，恒定的水源是至关重要的，因为在不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大。 水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。 对于酿造行业，水的重要性不言而喻 对于常规发酵，可靠、持久，能提供大量成分一致清洁的水。 第四节 发酵培养基的设计原理和优化方法 目前还不能完全从生化反应的基本原理来推断和计算出适合某一菌种的培养基配方，只能用生物化学、细胞生物学、微生物学等的基本理论，参照前人所使用的较适合某一类菌种的经验配方，再结合所用菌种和产品的特性，采用摇瓶、玻璃罐等小型发酵设备，按照一定的实验设计和实验方法选择出较为适合的培养基。 一、培养基成分选择的原则 菌种的同化能力 代谢的阻遏和诱导 合适的C、N比 100∶0.2～2.0 pH的要求 （一）、理论转化率与实际转化率 理论转化率是指理想状态下根据微生物的代谢途径进行物料衡算，所得出的转化率的大小。 实际转化率是指实际发酵过程中转化率的大小 如何使实际转化率接近于理论转化是发酵控制的一个目标 二、成分含量的确定 例: 如在酒精生产中葡萄糖转化为酒精的理论转化率计算如下∶ 葡萄糖转化为酒精的代谢总反应衡算式为∶ C6H12O6 ─→ 2C2H5OH + 2CO2 葡萄糖转化为酒精的理论得率为∶ 2*46 Y = ─── = 0.52 176 （二）、实