转座子Tn233(CH)链霉素敏感突变种及其回变种的研究.pdfVIP

遗传 学 报，12(2):83-92,1987 ActaGenetica3inica 转座子Tn233(CH)链霉素敏感突变种 及其回变种的研究 蔡瑞珠 张景六 洪孟民 （中国科学院上海植物生理研究所） 转座子Tn233-1(CH）是Tn233(CH）的链霉素敏感突变种，比较了突变种质粒 pBR322 ::In233-1(CII)DNA和野生型质粒 pBR322::.l-n233(CH夕DNA的 EcoRl,Bainfil,HindlII 与 PstI限制性内切酶图谱，结果表明Tn233-1(CH）中带链霉素抗性基因的限制片段 H3_L 插人了一个约 Soobp长的Is因子，在这个插入的 DNA 片段上有一个 Y.+t(切点而没有 EcoRI,BamHI及 HindIII切点。 对链霉素伉生！回变种的质粒 DNAPBR322::Fn233-1-R(CH）的限制图谱加以分析后表 明，插人在 H:；限制性片段上的 I5因子已经切除，但是限制片段 E2与 曰 的长度发生了改 变。此外，在限制片段 E2上出现了一个新的 IS插入片段，在这一插入片段上有一个HindIII 与 PstI切点。我们对此突变与回变的机理进行了讨论。 插人顺序 （is因子）是存在于原核生物的染色体或质粒 DNA上的一类转座因子， 到口前为止，已发现了十几种 1S因子，它们除了能在 DNA上来回移动外，还能钝化所 插入的基因，使插入位点附近的 DNA发生缺失、倒位、加倍等多种 DNA重排事件，一般 认为转座因子引起的 DNA重排在质粒的演化上起着重要的作用。 Tn233(CH）是我们实验室在痢疾杆菌的抗药质粒 DR233中发现的一个转座子，它 带有链霉素抗性基因、磺胺抗性基因以及汞盐抗性基因。我们除了对它的遗传性质、分子 大小与限制图进行了研究外Ll-33还对它所带的抗性基因与转座基因进行了定位 未（发表 资料）。本文报道我们对从转座子 Tn233(CH夕中分离到的链霉素敏感突变种与从敏感突 变种中分离到的链霉素抗性回变种所进行的研究；对1S因子在此种突变与回变中的作用、 回变的同时转座子与其载体连接位点发生的改变等现象进行了讨论。 材 料 与 方 法 一（）菌株、质粒和转座子 见表1所列。 二（）培养基及细菌抗药性的检定 见以前报道川。 三（）细菌质粒的接合转移按Grinsted等方法8I〔,DNA转化按 Norgard等方法1121 进行；转座子转座的检测方法及转座频率的侧定见以前报道LI［l；细菌质粒的提取，DNA 限制性内切酶反应系统，琼脂糖及聚丙烯酞胺凝胶电泳方法见以前报道2，〔。 本文于 1983年11月26日收到。 84 遗 传 学 报 ”卷 表1细菌菌株、质粒和转座子 Table1 Bacterialstrains,plasmidsandtransposons k}4`、质粒和转座子 Strains,plasmidsand 有 关 性 状 来源或资料 Relevantfeatures Sourcesor references transposons 菌株 (Strains) E.coliC600 苏氨酸，亮氨U，维生素 B；缺陷 F_ (thr一，leu一，B=,F-) ［61