中国武汉地区汉族人补体第四成份(C4）的遗传多态现象1).pdfVIP

遗传学报，14(1);69-76,1987 人ctaGenetica Sinica 中国武汉地区汉族人补体第四成份 (ca）的遗传多态现象’‘ 张文杰 田延武 余上斌 张业平 赵修竹 （同济医科大学病理生理学教研室，武汉） 对神经氨酸酶处理去涎的血浆进行高压琼脂糖电泳后，分别应用免疫固定和溶血覆盖技 术调查了我国武汉地区汉族180人的C4多态现象。在C4R座位发现5个变型：C4A4,3,2,1 和91；在CO 座位发现6个变型：C4B3,2,1,92,9W和％．两个座位均有静息等位基 因 (C414*QO和 C4B*QO）存在。它们相应的基因频率为：C4,4*4,0.014;3,0.633;2, 0．192；1，0．031；91，0。003；QO，0．14，；C4B*3，0．006；2，0．127；1，0．751；92，． 0.041;9tiV,0.003;96,0.006;Q0,0.066。单零 C4A(C4AQO）表型个体占总体28.3%}, 单零 C4B(C4BQO）占11.1%；纯合 C4A缺乏 C（4AQOJQO）和纯合 C4B缺乏 C（413 Q05QO)分别占0.56%。和1.11％卡方测验表明，C4,1．和C4B基因频率分别符合Hardy- Weinberg遗传平衡定律。 关键词 c4;多态现象；免疫固定；溶血覆盖技术。 1969年 Rosenfeld等用血浆或 EDTA血清在琼脂糖凝胶上电泳后继以交叉免疫电 泳，率先发现人补体C4的多态现象 p（olymorphism)Ezil。尔后 Rittner等通过家族研究发 现C4与HLA座位之间紧密连锁，因此认为C4基因位于主要组织相容性复合体 M（HC) 之内171〔 现已公认，C4,C2及B因子共同构成HLA的第三组，共同位于第6染色体短臂，在 HLA-B及 DR/D之间，同样呈现复杂的多态现象。1981年 Awdeh和 Alper称其表型 为补体型 c（omplotype)o 我国人口有10亿之众，是世界上最大的一个人类群体，但有关其C4的遗传情况迄今 尚一无所知，为此，我们先对武汉地区汉族人群进行了检测。 材 料 和 方 法 一（）样品 180份 EDTA抗凝血浆取自武汉地区汉族健康献血员，离心后立RIJ 检测或置一30Cc贮存至检测。 二（）神经氨酸酶处理血浆8【,101 产气荚膜梭状芽胞杆菌神4氨酸酶 (SigmatvDe 本文于1986年1月巧 日收到。 中国科学院科学基金资助的课题。 均本校法医学t研室秦启生从西德购置神经氨酸酶，83级研究生程健华及卫校实习生骆红艳协助采样，实验xs 学中心化学室沈安华协助薄层扫描，在此一并致谢。 夕口 遗 传 学 报 14卷 V）终浓度 10u/m1；或霍乱弧菌神经氨酸酶 兰（州生物制品所）终浓度 100u/ml,, 40C （或室温）温育约 18小时。 三（）C4定型191 (1)电泳分离：不连续 Tris／甘氨酸／巴比妥缓冲液，pH8.9o琼 脂糖浓度0.8% (agaroseA,Pharmacia),浇板IMM厚。每孔加样5Pd，在25V/cm.(500, V,70mA.60W;TPC-801三控高压电泳仪，江苏扬中电器厂）100C酒精循环冷却下电 泳分离约3小时，直至血红蛋白指示剂泳动IOcmo (2）免疫固定：不稀释的羊抗人C4 血清 上（海静安区医学化验所Y21，5川／cmz，均匀覆盖于凝胶板上，370C湿盒免疫固定2 小时 室（温3小时）．生理盐水漂洗，37℃干燥，0.25务考马斯亮篮染色。 （四）C4色带密度扫描 。〔，‘ 日本双波长薄层扫描仪 S（himadzu,CS-910)，波长 550nm，狭缝10X0.2mm。以C4A及 C4B色带扫描结果求取AFB比率，根据比率检出 C4的零基因 n（ullgene),, 五（）C4溶血机能鉴定[a-［ioa (1)效价1:40的正常豚鼠血清 武（