中华大蟾蜍第6染色体(核仁组成染色体)的研究I.巨大随体的发现及其遗传规律.pdfVIP

遗 传 学 报， 9(2);135--142，1982 ActaGenetica Sinica 中华大蟾蛛第6染色体核（仁组成染色体）的研究 I．巨大随体的发现及其遗传规律 ）‘ 尚克刚 蒋海燕2) （北京大学生物学系） 在 130只中华大蟾蛛中有17只个体 （占13%）在第6染色体的随体部位出现了巨大随体。 它们的大小在个体之间有显著的不同。这些大随体是额外增加的染色质，在染色质的性质上 不同于次缴痕，也没有 rDNA的转录活性。这些额外增大的随体与性别、年龄、季节和表型都 没有相关的联系，并且以简单的孟德尔方式遗传。 蟾蛛属中许多物种的染色体核型都已经进行了研究0,［14,16,181。中华大蟾赊 (BufoBufo gargarizans）的核型也已有所报道Ell。该物种的2n-22，在 11对同型的染色体中，第6 染色体的长臂末端带有明显的随体和次槛痕，这是唯一的具有随体的染色体，已被确认为 是带有核仁组织者区域的染色体 N（OR-染色体）。这些随体是圆形的小球状，但是吴政 安Ell曾报道了一例具有大随体的个体，该个体的一个第6染色体有一个巨大的随体，而其 同源染色体上没有随体，这是该个体所有细胞的共同特点。 类似于这种偶然发现的明显增大的随体或巨大随体，在其他物种中是曾经有过一些 报道的，其中尤以人类的情况最为突出。在正常人群中，曾经发现带有巨大随体的个体， 机会大约是 13务[81。此外，在植物中，特别是在百合中也有一些报道。巨大随体的出现 也是在同源的核仁组成染色体上造成在随体大小上异态的染色体5,‘10,2110 在两栖类中，除上述报道的一例以外，还没有关于异常的巨大随体的报告。本文作者 的预备实验表明，这种巨大随体的出现在中华大蟾赊中并不是非常偶见的。综上所述，本 研究的目的在于探明这些巨大随体出现的频率、形态、性质及其遗传规律。 材 料 与 方 法 一（）材料来源 中华大蟾赊 (Bufobufogargarizans）捕自北大校园和采购于北 京市海淀区实验动物供应站。1979年8月至 1980年3月期间，通过淋巴细胞培养获得 了130只个体的染色体制片 7（6雄性，54雌性）。 二（）淋巴细胞培养及染色体制片 1，参考 Moorchead等人[131关于人类白细胞培养的方法，以及 Seto等人[2D],RoundsfsrI 本文于 1981年1月2日收到。 1)本文是在李汝祺教授和昊鹤龄副教授的指导下进行的，并曾得到李薇锦同志、郑玉兰同志的协助，戴灼华同志 在数理统计方面给予帮助，谨此一并致谢。 2）北京市积水潭医院进修教师。 136 遗 传 学 报 9卷 和SchmidI培养两栖类淋巴细胞的方法，并做了一些改进。 2.2毫升注射器用肝素 (5001.U./ml,0.7务NaCI配制）湿润后由心脏直接取血。 取血1.0-1.5毫升，注射器于室温垂直静置30分钟至1小时，用140“角的弯针头将白细 胞层及上层血浆注人5毫升培养基中，白细胞无需计数。 3.为了符合两栖类的渗透压，我们配制的培养基如下：每100毫升培养基中含有： 19，培养基 或（ EaglesMEM) 48毫升 0.5％水解乳蛋白 （以不含 NaCI的Earle、液配制） 32毫升 犊牛血清 灭（活） 20毫升 青霉素 100单位，链霉素 100微克，芦山霉素 10微克，NaHCO，调节 pH 为 7.2-7.4 植物血球凝集素 (PHA）为盐水提取法自制。选用广州四季豆 P（haseolushumilis), 0.7外NaCI提取，浓度为2外，总蛋白量 3.3--4.8mg/ml,蟾蛛红血球凝集活力在1/400 以上。每5毫升培养基中加人0.2毫升上述PHA