在致突变试验中应重视对纺锤体毒物的检测.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)15(6):38-401993 ·综 述 · 在致突变试验中应重视对纺锤体毒物的检测 高 沛 永 浑事医学科学院放射医学研究所，北京 100850) BeStressedontheScreeningofSpindlePoisons 1n inMutagenesisTests GaoPeiyong (InstituteofRadiationMedicine,AcademyofMilitaryMedicalSciences,Beijing100850) 一、问题的提出 异x生物活性物质 X（enobioticchemical)除了可能具有细胞毒性 导（致细胞死亡）外，还可能具有遗传毒 性，即作用于遗传物质，损伤DNA和染色体，．这不仅会造成细胞死亡，还会诱发突变，引起癌肿．化学物质的 遗传毒性已受到人们的重视，成了致突变试验研究的目标 ’〔）．但是某些具有诱变致癌活性毒物的作用终点并不 是DNA和染色体．而是损伤细胞分裂中的纺锤体，造成染色体数目上的改变，如产生多倍体，特别是非整倍 体，使遗传物质在子细胞中分配不平衡，引发癌变等严重后果．目前致突变实验中所用的方法，只能检测出那些 诱发基因突变 如（Ames试验），或是作用于染色体本身能诱发畸变的诱变剂，对这些以纺锤体为生物学作用终 点的纺锤休毒物 S（pindlePoison,SP)是会漏检的．但这又是一类很重要的致癌毒物．所以，我们应尽早在致 突变试验中增加对SP的检测，走在世界的前列．因为目前国内尚未有这方面的实验报道．本文仅就国外对SP 研究的概况作一简要介绍，以期促进我国同行开展这方面的工作． 二、对非整倍体的检测 非整倍体即其染色体数比正常细胞超出或缺少一个或数个．一般认为，这种染色体数目上的改变，是由于分 裂中细胞质的异常，特别是因为诱变剂干扰了纺锤体而引起的．尽管其它细胞器如着丝粒、中心粒失活等因素也 不能被排除．所以，非整倍体的出现以及微核率的异常，可被认为是纺锤体损伤的一个反映．虽然检#l，11非整倍 体、微核等只是一种间接研究SP效应的方法，但比较简便，一般实验室均可进行，故进行SP的研究工作，是 用非整倍体或微核为指标的． 有些已被确认的致癌物，例如乙烯雌酚(DES)，并不诱发基因突变和染色体畸变 2)〔，但却能诱发哺乳类细胞和 酵母产生非整倍体；还有实验证明，DES诱发的地鼠胚胎细胞恶性转化与非整倍体都呈剂量依赖性增加 4,〔6t;20)． 38 在化疗引起的继发性白血病病人中，也发现有某些染色体丢失和／或获得的情况 1〔7)。所以，在评价遗传毒性的致 突变试验中，非整倍体是一个很有意义的指标，(22)． 经常用于研究非整倍体的方法，是计数分裂中期细胞的染色体数目．这种方法简便，但会受到人为因素的影 响，例如低渗处理及其他机械作用会使细胞膜破裂造成染色体丢失．在后来的工作中，用减弱低渗处理，慢加固 定液及保留细胞质的技术研究非整倍体，不仅避免了染色体的人为丢失，在观察非整倍休的同时，还可以计数染 色体结构上的畸变 5,（12)．利用荧光复合姬姆萨 (FPG）的染色技术，可将不同分裂周期的细胞区分开，观赛药 物处理后第一、二、三次分裂细胞的非整倍体发生率，以了解其与药物作用的时相关系 to（,m．流式徽荧光测量 分析 F（MFA）技术，是一种染色体畸变的自动分析方法，也已经用到了非整倍体的研究上．FMFA的实验结 果显示，环绕G、期和G2+M期峰值的变异系数，可能是表示非整倍体细胞存在的一个有意义的指标．使用特殊 高分辨脉冲流式测量技术，已成功地检查了白血病患者的非整倍体 (9)．分子生物学的原位杂交法，也可用于非 整倍体的研究，例如，用已知序列的核昔酸低聚物，作为探针鉴定着丝粒 (14)．近来的研究说明，此方法甚至能 在间期细胞核中对DES进行诱发非整倍体的评价 20（)．此外，还有用杭着丝粒抗体及阻断胞质分裂的方法，检 测非整倍体、微核等 6〔.7)．一组比利时学者强调了非整倍体在畸形、